Podešavanje slikovnog optičkog sustava svjetlosnog mikroskopa i nacrt mikroskopskog pregleda
Podešavanje sustava optičkog puta slike i nacrt mikroskopskog pregleda
Prilagodba slikovnog optičkog sustava mikroskopa provodi se prema potrebama različitih mikroskopskih tehnika. Takozvana mikroskopija, ukratko, je metoda osvjetljavanja koja se koristi pri promatranju uzorka kroz mikroskop, te tehnika i način dobivanja boljeg kontrasta na slici koju uzorak formira. Sljedeće ukratko opisuje mikroskopiju koja je sazrela u nekoliko metoda i odgovarajuću metodu prilagodbe optičkog sustava za snimanje mikroskopa.
1. Prijenosno svijetlo polje:
Ovo je najtradicionalnija i najčešća metoda primjene od izuma mikroskopa. Osnovne komponente: a. Objektiv: bilo koja objektivna leća može se koristiti za promatranje svijetlog polja; b. Optika: mogu se koristiti sve vrste optika, po mogućnosti opremljene dijafragmom otvora blende. Metoda prilagodbe: Nakon što se Kuhlerov sustav osvjetljenja gore navedenog mikroskopa prilagodi, može se primijeniti metoda svijetlog polja. Opseg primjene: svi obojeni dijelovi tkiva, razmazi krvi itd. Mjere opreza: a. Kada se koristi metoda promatranja svijetlog polja, mora se prilagoditi Kuhlerov sustav osvjetljenja; b. Dijafragma vidnog polja ne bi se trebala otvarati proizvoljno, a prednja leća kondenzorskog zrcala trebala bi biti postavljena prema van i u optičku stazu, odnosno kada se koriste leće objektiva od 10×, manje od 10× i više od 10 ×; c. Dijafragma otvora zrcala kondenzatora ne bi se trebala koristiti za podešavanje svjetline vidnog polja, a visina zrcala kondenzatora ne bi se smjela podešavati neselektivno, jer će se rezolucija mikroskopa smanjiti i razlučivost obojenog tkiva bit će oštećeni. rezolucija mikroskopa i oštećenja prilagođena je Kuhler sustavu osvjetljenja; d. za mikroslike, svaka promjena u korištenju povećanja leće objektiva, morate prilagoditi dijafragmu otvora sabirne leće, tako da njezina veličina bude točno jednaka numeričkoj aperturi koja se koristi u leći objektiva od 2/3.
2. Metoda faznog kontrasta propuštene svjetlosti:
Ovo je moderni mikroskopski pregled metode povećanja kontrasta. Osnovne komponente: fazno kontrastna leća objektiva, svijetlo vidno polje i fazno kontrastni višenamjenski spekter, teleskop za fokusiranje, zeleni filteri.
Metode prilagodbe:
a. Na temelju podešavanja Kuhlerovog sustava osvjetljenja, jasno fokusirajte uzorak pomoću metode svijetlog polja
b. Okrenite spektor na Ph1 kako biste poravnali položaj skale brojčanika, odaberite leću objektiva s faznim kontrastom 10 × i zamijenite prozirni uzorak koji želite promatrati.
c. Isključite jedan od okulara, zamijenite ga centriranim teleskopom i fokusirajte se na dva fazna kontrastna prstena u vidnom polju (crni fazni kontrastni prsten leće objektiva i fazni kontrastni prsten za prijenos svjetlosti sabirne leće).
d. Dva prstena za fazni kontrast u vidnom polju možda se neće nužno poklapati, podesite dva uređaja za podešavanje na spektilu (podešavanje lijevog i desnog položaja poluge za podešavanje prstena za fazni kontrast i podešavanje prednjeg i stražnjeg položaja tarnog gumba) , tako da se prsten za prijenos svjetla za prednju i stražnju stranu desno i lijevo podudara s crnim prstenom
e. Nakon podešavanja vratite se na okular za promatranje i pritisnite zeleni filtar u optički put kako biste promatrali sliku faznog kontrasta uzorka.
f. Kada za promatranje postoje objektivi 20× i 40×, reflektor treba postaviti na položaj Ph2, a kod korištenja objektiva 100, reflektor treba postaviti na položaj Ph3.
Opseg primjene: Pogodan je za promatranje prozirnih, neobojanih ili neobojanih uzoraka, kao što su sve vrste stanica, živa tkiva, neobojeni ili neobojeni dijelovi tkiva, vodeni organizmi i tako dalje.
3. Metoda faznog kontrasta diferencijalne interferencije:
Kako bi se nadvladala metoda faznog kontrasta promatranja detalja uzorka oko slike popraćenih aureolom, maskirat će se detalji koji su se trebali vidjeti, kao i uzorci ili dijelovi tkiva zahtijevaju prilično tanku debljinu, u načelu, mogu biti deblji od 10 µm i druga ograničenja, korištenje načela interferencije s dva snopa za projektiranje sub-diferencijalne interferencijske metode faznog kontrasta.
Metode prilagodbe:
a. DIC metoda se mora prilagoditi na temelju toga što je Kulemin sustav već podešen
b. Koristeći leću objektiva 10x, odredite položaj fokusiranja leće objektiva koji može jasno vidjeti uzorak sa svijetlim vidnim poljem.
c. Postavite polarizator na putanju osvjetljenja, imajući na umu da treba biti usmjeren u smjeru istok-zapad.
d. Okrenite kotačić kondenzatora u položaj koji odgovara upotrebi objektiva 10 ×, tj. DIC 0.3-0.4.
e. Umetnite DIC klizač za leću objektiva 10x na stražnju stranu leće objektiva ili na pretvarač objektiva.
f. Umetnite analizator u optičku putanju slike i imajte na umu da njegova orijentacija treba biti jug-sjever.
g. Zamijenite prozirni uzorak koji želite promatrati, uključite izvor svjetla kako biste jasno fokusirali uzorak.
h. Podesite DIC umetak tako da diferencijalna interferencija kontrastira sliku kako biste postigli najbolji učinak, odnosno najočitiji učinak reljefa.
ja U isto vrijeme podesite dijafragmu otvora blende zrcala kondenzatora, tako da je i učinak kontrasta optimalan.
j. Zatim fino podesite detalje uzorka da biste vidjeli strukturu uzorka na različitim razinama.
k. Ako se umetne komplementarna boja (crvena retardacijska ploča prvog reda) i istovremeno prilagodi DIC umetak, u vidnom polju mogu se vidjeti briljantne boje koje se stalno mijenjaju, s crvenom, narančastom, žutom, zelenom, plavom, ljubičasta, ružičasta, ružičasto-ljubičasta i zlatno-žuta. Područje primjene: prozirni ili neobojljivi isječci tkiva, debljine do oko 100 µm, živo tkivo i žive stanice u kulturi, mali živi organizmi i tako dalje.
