Biološka mikroskopija volumena blokova tkiva
Biomikroskopija Do danas su fiksacija na hladnom ledu, zamrznuti ultratanki rezovi i zamrznuta suha manipulacija rutinske metode za rendgenska mikropolja tkiva i stanica. Pojedinosti metode objašnjene su u sljedećim točkama:
Biološki mikroskopi Mikroskopi sa sabirnom lećom mogu se pomicati gore-dolje kako bi se postigla umjerena svjetlina ili se otvor blende ekspandera varijabilnog svjetla može promijeniti da se postigne umjerena svjetlina 9b. Ako je svjetlo sunčano, reflektor se može odgovarajuće podići, a otvor blende promjenjivog svjetla može se odgovarajuće povećati. Ako je svjetlo prejako, tada se ogledalo reflektora može postaviti prema dolje, otvor blende promjenjivog svjetla za odgovarajuće smanjenje. Ako se u ovom slučaju i dalje osjećate zasljepljujućim, tada možete odabrati odgovarajući filtar postavljen u nosač ispod reflektora. Ovo se može dobiti kako biste bili zadovoljni svjetlinom. Naravno, pri podešavanju gornjeg i donjeg položaja sabirne leće može se mijenjati veličina otvora blende za očitavanje svjetla i odabir odgovarajućih filtera, to jest nakon određenog razdoblja prakse i iskustva.
Biološki mikroskop Vrlo važno pitanje je u procesu uzorkovanja i odvajanja stanica, sušenja zamrzavanjem i ugradnje smole (FD) nakon zamrzavanja ultra-knjižica, sušenja zamrzavanjem nakon finog rada svakog dijela sadržaja 65 elementarnog sastava mora biti rukovati vrlo pažljivo i ne smije oštetiti stanice koje treba promatrati i analizirati. Budući da analiza rendgenskih mikropodručja nije samo puno koraka, a cijena je vrlo visoka, ako su nakon dugo vremena i više koraka obrade analizirane stanice oštećene stanice ili mrtve stanice, izvući pogrešne zaključke je vrlo žalosno. Na primjer, kardiomiociti izolirani tretmanom kolagenazom imaju dvije morfologije, jedna je u obliku dugih štapića, a druga je okrugla. Potonje su umiruće stanice koje su oštećene tijekom izolacije stanica.
Biomikroskopija Sadržaj i raspodjela elektrolita u ove dvije vrste stanica vrlo su različiti. Na je bio vrlo visok, a K vrlo nizak u okruglim kardiomiocitima, a koncentracija ca bila je vrlo visoka u mitohondrijima. Nakon provjere drugim analitičkim metodama, pokazalo se da su visoki Na i niski K u okruglim stanicama i visoki ca u mitohondrijima rezultat oštećenja stanične membrane tijekom odvajanja stanica. Hladna fiksacija stanica i tkiva često se provodi fiksacijom gašenja nakon koje slijedi konzerviranje u tekućem dušiku. Fiksacija gašenjem je važna za učinkovitost konzerviranja. Žive stanice ili svježa tkiva bogata su vodom, pri kaljenju su stanice ili tkiva često i hladni agens (osobito s čistim hladnim tekućim dušikom) u izravnom kontaktu s dijelovima prve fiksacije smrzavanjem, tvoreći tako "ljusku", koja sprječava hladnu fiksaciju središta stanice. Kao rezultat toga, kristali leda često se nalaze u središtu većih stanica tijekom rendgenske mikrostanične analize. Kako bi se to spriječilo, kao sredstva za hlađenje koriste se tvari s točkom tališta višom od tekućeg dušika, ali nižom od 806c suhog. Postoji mnogo takvih tvari, ali * lako ih je nabaviti, jeftin je koncentrirani propan (vrelište 42,120c, talište 187,10c, molekularna težina 44,1), brzina hlađenja * brza. Međutim, nedostatak mu je što je zapaljiv.
Biološki mikroskop može se postaviti na posebnu policu mišićnih vlakana, tako da se kontrakcija mišićnih vlakana za postizanje određene vremenske faze mora fiksirati, odmah pokrenite mlaznicu, tako da tekući propan dospije u mlaz mišićnih vlakana, tako da se gasi hladnoća fiksna. Zatim se muskulfiber izvadi zajedno sa stalkom i stavi u tekući dušik. Ako fiksiranje krvnih stanica ili izoliranih stanica, prvo centrifugiranjem niske brzine kako bi se stanice koncentrirale, stanice će biti prebačene u srebrnu cijev dobre toplinske vodljivosti, cijev u hladno fiksirano truplo tekućeg propana. Hall laboratorij fiksirao je gušteraču štakora, prva dva komada čelika s prethodnim hlađenjem tekućim helijem (ili tekućim dušikom), sa stezaljkom stegnutom, dva komada bakra bit će postavljena ispred i iza gušterače, tako da teta gland quenching hladna fiksacija. Tkiva ili stanice mogu se pohraniti u tekućem dušiku dugo vremena nakon gašenja i fiksiranja.
