Metoda izravnog brojanja mikrobnih mikroskopa
Korištenje hemocitometra za izravno brojanje mikroorganizama pod mikroskopom često je korištena metoda za brojanje mikroba. Prednost ove metode je njezina intuitivnost i brzina. Stavite odgovarajuće razrijeđenu bakterijsku suspenziju (ili suspenziju spora) u komoru za brojanje između stakalca hemocitometra i pokrovnog stakalca i brojite pod mikroskopom. Zbog konstantnog volumena sobe za brojanje (0,1 mm2), ukupan broj mikroorganizama po jedinici volumena može se pretvoriti na temelju broja mikroorganizama promatranih pod mikroskopom. Zbog činjenice da ova metoda izračunava zbroj živih i mrtvih bakterijskih stanica, poznata je i kao metoda ukupnog broja bakterija.
Ploča za brojanje krvnih stanica obično je posebno dizajnirano staklo s četiri utora koji tvore tri platforme. Srednja platforma podijeljena je na pola kratkim horizontalnim utorom, a svaka strana platforme je ugravirana mrežom. Svaka rešetka podijeljena je na devet velikih kvadrata, a veliki kvadrat u sredini je soba za brojanje, gdje se vrši brojanje mikroba.
Općenito postoje dvije specifikacije za ljestvicu sobe za brojanje. Jedan je da je veliki kvadrat podijeljen na 16 srednjih kvadrata, a svaki srednji kvadrat je dalje podijeljen na 25 malih kvadrata (Slika VIII -2); Druga metoda je da se veliki kvadrat podijeli na 25 srednjih kvadrata, a svaki srednji kvadrat se dalje podijeli na 16 malih kvadrata (Slika VIII -1, C). Ali bez obzira na veličinu ploče za brojanje, broj malih polja u svakom velikom polju je isti, to jest 16 × 25=400 malih polja.
Ako je duljina stranice svakog velikog kvadrata 1 mm, površina svakog velikog kvadrata je 1 mm2. Nakon prekrivanja pokrovnim staklom, visina između stakalca i pokrovnog stakla je 0,1 mm, tako da je volumen sobe za brojanje 0,1 mm3.
Pri brojanju se obično računa ukupan broj bakterija u pet kvadrata, a zatim se dobije prosječna vrijednost svakog kvadrata. Množenjem sa 16 ili 25 dobiva se ukupan broj bakterija u velikom kvadratu, koji se zatim pretvara u ukupni broj bakterija u 1 ml bakterijske otopine.
