Metoda izravnog brojanja mikroorganizama
1. Razrjeđivanje
Razrijedite suspenziju pivskog kvasca na odgovarajući način. Ako otopina bakterija nije koncentrirana, ne treba je razrjeđivati.
2. Soba za brojanje ogledala
Prije dodavanja uzoraka, provedite mikroskopski pregled komore za brojanje ploče za brojanje. Ako ima prljavštine, potrebno ju je očistiti prije brojanja.
3. Dodajte uzorke
Pokrijte čistu i suhu pločicu za brojanje krvnih stanica pokrovnim staklom, a zatim upotrijebite sterilnu kapaljku s finim otvorom da ispustite malu kapljicu (ne previše) razrijeđene tekućine pivskog kvasca s ruba pokrovnog stakla, dopuštajući bakterijskoj tekućini da ulaze u prostoriju za brojanje kroz kapilarnu permeaciju duž otvora. Općenito, prostorija za brojanje može se napuniti bakterijskom tekućinom. Pazite da ne napravite mjehuriće.
4. Mikroskopsko brojanje
Nakon mirovanja 5 minuta, stavite ploču za brojanje krvnih stanica na postolje mikroskopa, najprije upotrijebite mikroskop male snage kako biste locirali komoru za brojanje, a zatim prijeđite na mikroskop velike snage za brojanje. Ako se ustanovi da je bakterijska otopina previše koncentrirana ili previše razrijeđena prije brojanja, razrjeđenje treba ponovno prilagoditi prije brojanja. Opći zahtjev za razrjeđivanje uzorka je oko 5-10 bakterijskih stanica po maloj rešetki. Odaberite 5 ćelija iz svake sobe za brojanje (po izboru 4 kuta i središnje ćelije) za brojanje. Bakterijske stanice koje se nalaze na crti mreže općenito se broje samo na gornjoj i desnoj liniji. Kada kvasac nikne i veličina pupoljka dosegne polovicu matične stanice, mjere se dva broja bakterija. Brojanje uzorka zahtijeva dobivanje vrijednosti iz dvije komore za brojanje kako bi se izračunao sadržaj bakterija u uzorku.
5. Očistite hemocitometar
Nakon upotrebe hemocitometar isperite vodenim stupcem na slavini. Nemojte prati tvrdim predmetima. Nakon pranja osušite na zraku ili sušilom za kosu. Mikroskopskim pregledom, promatrajte postoje li zaostale bakterije ili drugi sediment u svakoj maloj stanici. Ako nije čist, mora se više puta prati dok ne bude čist.
