Izravna metoda mikrobiološkog brojanja
Korištenje hemocitometra za izravno brojanje mikroorganizama pod mikroskopom uobičajena je metoda za brojanje mikroba. Prednost ove metode je njegova intuitivnost i brzina. Stavite odgovarajuće razrijeđenu bakterijsku suspenziju (ili suspenziju spora) u komoru za brojanje između klizača hemocitometra i prekrivačkog klizača, te brojite pod mikroskopom. Zbog konstantnog volumena sobe za brojanje ({0. 1 mm2), ukupni broj mikroorganizama po jedinici volumena može se pretvoriti na temelju broja mikroorganizama opaženih u mikroskopu. Zbog činjenice da ova metoda izračunava zbroj živih i mrtvih bakterijskih stanica, poznata je i kao metoda ukupnog broja bakterija.
Ploča za brojanje krvnih stanica obično je posebno dizajnirana staklena tobogana s četiri utora koji tvore tri platforme. Srednja platforma podijeljena je na pola kratkih vodoravnih utora, a svaka strana platforme ugravirana je rešetkom. Svaka je mreža podijeljena u devet velikih kvadrata, a veliki kvadrat u sredini je soba za brojanje, gdje se provodi brojanje mikroba.
Općenito postoje dvije specifikacije za razmjere brojanja. Jedan je da je veliki kvadrat podijeljen na 16 srednjih kvadrata, a svaki je srednji kvadrat nadalje podijeljen u 25 malih kvadrata (slika VIII -2); Druga metoda je podijeliti veliki kvadrat na 25 srednjih kvadrata, a svaki je srednji kvadrat dodatno podijeljen u 16 malih kvadrata (slika VIII -1, c). Ali bez obzira na veličinu ploče za brojanje, broj malih kvadrata u svakom velikom kvadratu isti je, to jest, 16 × 25=400 mali kvadrati.
Ako je bočna duljina svakog velikog kvadrata 1 mm, površina svakog velikog kvadrata je 1 mm2. Nakon pokrivanja pokrovnim staklom, visina između klizača i stakla s poklopcem je 0. 1 mm, tako da je volumen sobe za brojanje 0. 1mm3.
Pri brojenju obično se broji ukupan broj bakterija u pet kvadrata, a zatim se dobiva prosječna vrijednost svakog kvadrata. Pomnožavanje sa 16 ili 25 daje ukupni broj bakterija u velikom kvadratu, koji se zatim pretvara u ukupni broj bakterija u 1 ml bakterijske otopine.
