Funkcije svakog filtra u fluorescentnom mikroskopu
Najkritičniji problem kod fluorescentne mikroskopije je kombinacija optičkih filtara. I pobudni filtar i zaštitni filtar moraju biti prikladni za promatrani fluorescentni materijal i međusobno usklađeni. Za neke posebne aplikacije, ako postoje pogreške u odabiru filtera, to može dovesti do nesporazuma, pa čak i netočnih rezultata. Dostignuća tehnologije fluorescentne mikroskopije neodvojiva su od visoko-kvalitetnih filtara i pametno usklađenih filtarskih grupa. Postoji nekoliko vrsta filtara za fluorescentnu mikroskopiju.
1. Filter koji apsorbira toplinu
Filtar koji apsorbira toplinu neophodan je filtar za sprječavanje oštećenja optičkog sustava od toplinskog zračenja u spektru izvora svjetlosti. Rani napredni mikroskopi bili su opremljeni bocama u obliku bubnja koje su mogle držati destiliranu vodu kao uređaj za apsorbiranje topline. Moderni veliki -istraživački mikroskopi opremljeni su staklenim filtrima koji apsorbiraju toplinu u svjetlosnim kutijama izvora svjetlosti ili komorama za svjetiljke, koje su prozirne i blago žute staklene ploče. Leitz-ovi filteri KG1 (2 mm) i BG38 (4 mm) mogu propuštati gotovo sve spektre ultraljubičastog i vidljivog svjetla, uz stopu propuštanja svjetlosti do 98%. Samo selektivno apsorbira infracrveno fototermalno zračenje.
2. Filtar uzbude
Ekscitacijski filtri mogu selektivno apsorbirati spektralne linije dugih valnih duljina i propuštati samo ultraljubičasto svjetlo. Ljubičasti, plavi i zeleni svjetlosni filtri su pobudni filtri. Zeiss, Reichert, Olympusova B serija, G serija, BG serija, Shottova UG serija, Optonova H, G, BP serija, Leitzova BP serija i drugi optički filtri su pobudni filtri.
3. Filter za blokiranje
Blokirajući filtar je filtar koji selektivno apsorbira kratkovalne spektralne linije i infracrvene zrake dok omogućuje da se vide duži valovi. Njegova je funkcija omogućiti promatraču da vidi fluorescenciju koju izaziva predmet koji se pregledava, dok istovremeno štiti rožnicu promatrača od UV oštećenja.
4. Filter za odvajanje boja
Filtar za odvajanje boja je filtarsko zrcalo koje reflektira svjetlo pobude na predmet koji se pregledava, uzrokujući da objekt emitira fluorescenciju, a zatim prenosi fluorescenciju na okular. Ova vrsta filtra može se koristiti samo u kondenzatoru padajućeg svjetla, dok fluorescentni mikroskop propuštenog svjetla ne zahtijeva odvajanje boja.
5. Filter za smetnje
Interferencijski filtar vrsta je-pobudnog filtra visokih performansi. To je filtar napravljen slaganjem nekoliko tankih metalnih filmova između dvije polirane staklene ploče. Indeks loma svakog tankog metalnog filma je različit, tako da se spektralne linije različitih valnih duljina izvora svjetlosti opetovano reflektiraju na svakom metalnom filmu. Neke spektralne linije određenih valnih duljina poništene su destruktivnom interferencijom, dok su druge pojačane aditivnom interferencijom i propuštene. To rezultira filtrom s uskim spektrom prijenosa i širinom pola vrha od samo 6-20 nm. Prijenos može doseći 60% -70%.
