Kako odabrati između invertnog mikroskopa i fluorescentnog mikroskopa?
Mikroskop je važan instrument u kulturi stanica i srodnim eksperimentima s derivatima. Trenutačno na tržištu postoje različite vrste mikroskopa, a odabir mikroskopa koji zadovoljava potrebe i prikladan je izazov. U nastavku ćemo predstaviti principe invertiranih mikroskopa i fluorescentnih mikroskopa koje svatko može izabrati.
Invertni mikroskop, kao i obični mikroskop, uglavnom se sastoji od tri dijela: mehanički dio, dio za osvjetljavanje i optički dio. Sastav obrnutog mikroskopa isti je kao i kod običnog uspravnog mikroskopa, osim što su leća objektiva i sustav osvjetljenja obrnuti, s prvim ispod postolja, a drugim iznad postolja. Ova struktura značajno proširuje efektivnu udaljenost između sustava rasvjetnih reflektora i pozornice, olakšavajući postavljanje debljih alata za promatranje kao što su posudice za kulturu i boce za kulturu stanica (naravno, mogu se koristiti i stakalci), dok je radna udaljenost između objektiv i materijal ne moraju biti jako veliki. Invertirani mikroskop koriste medicinske i zdravstvene ustanove, sveučilišta i istraživački instituti za promatranje mikroorganizama, stanica, bakterija, kultura tkiva, suspenzija, sedimenata itd. Njime se može kontinuirano promatrati proces stanične i bakterijske proliferacije i diobe u mediju kulture, te može uhvatiti bilo koji oblik ovog procesa. Široko se koristi u područjima kao što su citologija, parazitologija, onkologija, imunologija, genetski inženjering, industrijska mikrobiologija i botanika.
Fluorescentna mikroskopija koristi se za proučavanje apsorpcije, transporta, distribucije i lokalizacije tvari unutar stanica. Za ispitivani objekt postoje dva načina generiranja fluorescencije: spontana fluorescencija, koja se izravno emitira ultraljubičastim zračenjem; Sekundarna fluorescencija nastaje kada se promatrani objekt tretira fluorescentnim bojama i izloži ultraljubičastom svjetlu prije emitiranja fluorescencije. Neke tvari u stanicama, poput klorofila, proizvode spontanu fluorescenciju nakon što su izložene ultraljubičastom zračenju; Neke tvari same po sebi možda neće emitirati fluorescenciju, ali ako su obojene fluorescentnim bojama ili fluorescentnim antitijelima, također mogu emitirati sekundarnu fluorescenciju pod ultraljubičastim zračenjem. Fluorescencijski mikroskop koristi točkasti izvor svjetlosti visoke svjetlosne učinkovitosti za emitiranje određene valne duljine svjetlosti (UV 365 nm ili UV plavo 420 nm) kroz sustav filtriranja boja kao pobudno svjetlo, koje pobuđuje fluorescentne tvari u uzorku da emitiraju različite boje fluorescencije. Nakon toga se promatra kroz povećanje objektiva i okulara. Na taj način, čak i sa slabom fluorescencijom, lako je prepoznatljiv i vrlo osjetljiv pod jakim kontrastnim pozadinama. Uglavnom se koristi za proučavanje stanične strukture, funkcije i kemijskog sastava.
Fluorescentna mikroskopija može se podijeliti u dvije vrste: prijenosna i padajuća. Prvi je primitivniji, dok je drugi napredniji. Osnovna konstrukcija dviju vrsta fluorescentnih mikroskopa je slična, s glavnom razlikom u tome što propuštena pobudna svjetlost prolazi kroz uzorak, proizvodeći fluorescenciju u cjelini. Fluorescencija tada ulazi u leću objektiva, a što je veće povećanje, to je fluorescencija slabija; Padajuće pobudno svjetlo projicira se na površinu uzorka, stvarajući fluorescenciju koja ulazi u leću objektiva. Što je veće povećanje, to je jača fluorescencija, što ga čini pogodnim za promatranje velike snage. Glavne komponente fluorescentnog mikroskopa uključuju izvor svjetla živine lampe, filtarsku ploču za pobudu, spektrofotometar (kapljičasti tip), filtarsku ploču za potiskivanje i kondenzator tamnog polja (transmisioni tip). Osim toga, zbog jakog zagrijavanja živinih žarulja, većina ih je također opremljena filtrima koji apsorbiraju toplinu. Neki fluorescentni mikroskopi također imaju fazni kontrastni objektiv i kružni otvor, što omogućuje opažanje faznog kontrasta. Neki fluorescentni mikroskopi imaju invertnu strukturu, što je također invertni mikroskop, i tako dalje.
Osim toga, gore spomenuti mikroskopi mogu se sastaviti u digitalne mikroskope instaliranjem CCD-a, koji pretvara fizičke slike koje vidi mikroskop u digitalne analogne slike i snima ih na računalu. Kao rezultat toga, možemo prebaciti naše istraživanje u mikro polju s tradicionalnog binokularnog promatranja na reprodukciju putem zaslona, čime se poboljšava radna učinkovitost.
