Metode snimanja svijetlih i tamnih polja fluorescentne mikroskopije
(1) Snimanje u svijetlom polju (BFI), koje omogućuje prolazak samo emitiranih elektrona u paraksijalnom području kroz otvor objektiva, tvoreći tamnu sliku na svijetloj pozadini. Što je manji otvor leće objektiva, to je veći kontrast slike svijetlog polja; (2) Oslikavanje tamnog polja (DFI), koje dopušta samo dijelu zrake raspršene pod velikim kutom ili difrakcijske zrake kristala da prođe kroz otvor leće objektiva, dok blokira emitiranu zraku. Ovo stvara svijetlu grafičku sliku na tamnoj pozadini. Ova metoda snimanja tamnog polja može poboljšati kontrast slika i važna je metoda snimanja.
Postoje otprilike četiri metode fluorescentne mikroskopije za postizanje slike tamnog polja: (1) održavanje okomitog osvjetljenja duž optičke osi dok se pomiče otvor objektiva; (2) Korištenje kosog osvjetljenja za dobivanje raspršenih zraka u smjeru optičke osi naziva se Central Dark Field Imaging (CDFI); (3) Otvor leće objektiva sa središnjim blokiranjem zrake i kružnim prozirnim područjem; (4) Upotrijebite kružni prozirni reflektor za otkrivanje svjetlosti i otvor objektiva sa središnjom kružnom rupom. * Metode ovdje su jednostavne i prikladne, ali koriste elektroničko oslikavanje u udaljenom području rukava, što rezultira velikim aberacijama i lošom kvalitetom slike. Drugom metodom mogu se izbjeći gore navedeni nedostaci, ali otvor objektiva Leica fluorescentnog mikroskopa prima samo mali dio raspršenih difraktiranih elektrona, što rezultira nižom učinkovitošću. Strana otvora blende često je bombardirana velikim brojem elektrona, što može lako uzrokovati asimetrično onečišćenje i utjecati na kvalitetu slike. Kružni objektiv je u tom smislu poboljšan, ali nedostatak je što ga je teško izraditi i teško je postići potpunu osnu simetriju. S obzirom na relativno opuštene zahtjeve za sustav osvjetljenja, može se usvojiti potonje rješenje, koje uključuje dodavanje kružnog otvora na kondenzatoru kako bi se osiguralo šuplje osvjetljenje za uzorak. Učinak ovog uređaja. Njegova razlučivost slike može biti blizu slike svijetlog polja, dok je kontrast znatno poboljšan.
