Metode snimanja svijetlog-polja i tamnog-polja u fluorescentnoj mikroskopiji
(1) Metoda snimanja svijetlim poljem (BFI), koja samo dopušta propuštenu zraku elektrona u paraksijalnom području da prođe kroz otvor objektiva, tvoreći tamnu sliku na svijetloj pozadini. Što je manji otvor blende objektiva, veći je kontrast slike svijetlog polja; (2) Oslikavanje tamnog polja (DFI) je tehnika koja dopušta samo dijelu zrake raspršenog pod velikim kutom ili određenoj difrakcijskoj zraki kristala da prođe kroz otvor objektiva, dok blokira emitiranu zraku. To stvara svijetlu grafičku sliku na tamnoj pozadini. Ova metoda snimanja tamnog polja može poboljšati kontrast slika i važna je tehnika snimanja.
Postoje otprilike četiri metode za postizanje slika tamnog polja korištenjem Leica fluorescentnih mikroskopa: (1) održavanje okomitog osvjetljenja duž optičke osi uz pomicanje otvora objektiva; (2) Korištenje kosog osvjetljenja za hvatanje raspršenih zraka u smjeru optičke osi naziva se Central Dark Field Imaging (CDFI); (3) Otvor objektiva sa središnjim graničnikom snopa i kružnim prozirnim područjem; (4) Upotrijebite kružnu prozirnu sabirnu leću za svjetlosni senzor i središnji kružni otvor za leću objektiva. Metoda * ovdje je najjednostavnija, ali koristi elektroničko snimanje u distalnom području rukava, tako da je aberacija velika i kvaliteta slike nije baš dobra. Drugom metodom mogu se izbjeći gore navedeni nedostaci, ali otvor objektiva fluorescentnog mikroskopa Leica prima samo mali dio raspršenih difraktiranih elektrona, što rezultira nižom učinkovitošću. Strana otvora blende često je izložena velikom broju bombardiranja elektronima, što može lako uzrokovati asimetričnu kontaminaciju i utjecati na kvalitetu slike. Prstenasta leća objektiva je poboljšana u ovom aspektu, ali je nedostatak to što ju je teško proizvesti i teško je postići potpunu osnu simetriju. S obzirom na relativno opuštene zahtjeve za sustav osvjetljenja, može se usvojiti potonje rješenje, koje uključuje dodavanje prstenaste blende na kondenzatoru kako bi se osiguralo osvjetljenje uzorka šupljim snopom. Učinak ovog uređaja. Njegova razlučivost slike može biti blizu slike svijetlog polja, dok je kontrast znatno poboljšan.
