Uvod u opće optičke mikroskope
Mikroskop je primarni alat za promatranje stanica. Prema različitim izvorima svjetlosti, mogu se podijeliti u dvije kategorije: optički mikroskopi i elektronski mikroskopi. Prvi koristi vidljivu svjetlost (UV mikroskop koristi ultraljubičasto svjetlo) kao izvor svjetlosti, dok drugi koristi snop elektrona kao izvor svjetlosti. Obični optički mikroskopi i laserski konfokalni mikroskopi su optički mikroskopi.
Obični biološki mikroskopi sastoje se od tri dijela, naime: ① sustav osvjetljenja, uključujući izvor svjetlosti i kondenzator; ② sustav optičkog povećanja, koji se sastoji od objektiva i okulara, koji je glavno tijelo mikroskopa. Kako bi se uklonile sferne aberacije i kromatske aberacije, i okular i leća objektiva sastavljeni su od složene grupe leća; ③ mehanički uređaj, koji se koristi za fiksiranje materijala i olakšavanje promatranja.
Hoće li mikroskopska slika biti jasna ne ovisi samo o povećanju, već i o rezoluciji mikroskopa. Rezolucija se odnosi na sposobnost mikroskopa (ili ljudskog oka udaljenog 25 cm od cilja) da razlikuje najmanju udaljenost između objekata. Veličina rezolucije određuje Na temelju valne duljine svjetlosti, omjera otvora leće i indeksa loma medija, formula se izražava kao:
R=0.61λ/NANA =ｎsin /2
U formuli: n=indeks loma medija; =kut otvora zrcala (kut otvora uzorka u odnosu na otvor objektiva), NA=numerički otvor. Kut zrcala je uvijek manji od 180 stupnjeva, tako da maksimalna vrijednost sina/2 mora biti manja od 1.
Indeks loma stakla koje se koristi za izradu optičkih leća je 1,65~1,78. Što je indeks loma korištenog medija bliži indeksu loma stakla, to bolje. Za suhe leće objektiva medij je zrak, a omjer otvora leće je općenito 0.05~0,95; za uljne leće kao medij se koristi cedrovo ulje, a omjer otvora leće može biti blizu 1,5.
Valna duljina obične svjetlosti je 400~700nm, tako da vrijednost rezolucije mikroskopa neće biti manja od 0,2μm. Razlučivost ljudskog oka je 0,2 mm, tako da je maksimalno povećanje općeg dizajna mikroskopa obično 1000X.
