Laserski konfokalni mikroskop Princip rada
Laserska konfokalna mikroskopija temelji se na slikanju fluorescentnim mikroskopom uz dodatak uređaja za lasersko skeniranje, korištenje računalne obrade slike, razlučivost optičke slike povećana za 30% - 40%, korištenje ultraljubičaste ili vidljive svjetlosti pobuđene fluorescentnim sonde, kako bi se dobila fluorescentna slika unutarnje mikrostrukture stanica ili tkiva, na substaničnoj razini za promatranje fizioloških signala i promjena stanične morfologije, kao što su Ca2+, PH, membranski potencijal itd., postalo je nova generacija snažnih istraživačkih alata u morfologiji, molekularnoj biologiji, neuroznanosti, farmakologiji, genetici i drugim područjima. Laserski konfokalni sustav snimanja moćna je nova generacija istraživačkih alata u poljima morfologije, molekularne biologije, neuroznanosti, farmakologije, genetike i tako dalje. Laserski konfokalni sustav snimanja može se koristiti za promatranje raznih obojenih, neobojanih i fluorescentno obilježenih tkiva i stanica, itd., za promatranje i proučavanje rasta i razvoja dijelova tkiva i stanica in vivo, te za proučavanje i mjerenje unutarstaničnih transport tvari i pretvorba energije. Sposoban je provoditi proučavanje ionskih i PH promjena u živim stanicama (RATIO), istraživanje neurotransmitera, diferencijalnu interferenciju i fluorescentnu tomografiju, višestruku fluorescentnu tomografiju i preklapanje, fluorescentnu spektroskopiju, analizu fluorescentnih pokazatelja, kvantitativnu analizu fluorescentnih uzoraka vremena- odgođeno skeniranje i dinamičke komponente trodimenzionalne dinamičke strukture tkiva i stanica, analiza prijenosa energije rezonancije fluorescencije, fluorescentno in situ hibridizacijsko istraživanje (FISH), istraživanje citoskeleta (FISH), te proučavanje citoskeleta. FISH), istraživanje citoskeleta, istraživanje lokalizacije gena, in situ analiza proizvoda PCR u stvarnom vremenu, istraživanje oporavka fluorescentnog izbjeljivanja (FRAP), istraživanje međustanične komunikacije, istraživanje međuproteina, istraživanje membranskog potencijala i fluidnosti membrane itd., kako bi se dovršilo analiza analize slike i trodimenzionalne rekonstrukcije i druge analize.
Područja primjene sustava laserskog konfokalnog mikroskopa:
Uključuje medicinu, znanstvena istraživanja na životinjama i biljkama, biokemiju, **ologiju, staničnu biologiju, tkivni embrij, znanost o hrani, genetiku, farmakologiju, fiziologiju, optiku, patologiju, botaniku, neuroznanost, biologiju mora, znanost o materijalima, elektroničku znanost, mehaniku, naftu geologija, mineralogija.
Osnovni principi
Tradicionalni optički mikroskop koristi poljski izvor svjetlosti, slika svake točke na uzorku bit će ometena difrakcijom ili raspršenjem svjetlosti od susjednih točaka; laserski konfokalni mikroskop koristi lasersku zraku kroz osvjetljavajuću rupicu za formiranje točkastog izvora svjetlosti za skeniranje svake točke na žarišnoj ravnini uzorka, ozračena točka na uzorku bit će prikazana na rupici za otkrivanje, a zatim ju će primiti rupu za otkrivanje nakon cijevi za množenje točaka (PMT) ili uređaja za hladno elektrospojovanje (cCCD), točku po točku ili liniju po liniju, a zatim se brzo prikazuju na monitoru računala. Primljena točku po točku ili liniju po liniju pomoću PMT-a ili cCCD-a iza rupice sonde, fluorescentna slika se brzo formira na zaslonu monitora računala. Rupica za osvjetljavanje i rupica za otkrivanje konjugirane su u odnosu na žarišnu ravninu leće objektiva, točke na žarišnoj ravnini fokusirane su na rupicu za osvjetljavanje i rupicu za emisiju u isto vrijeme, a točke izvan žarišne ravnine neće slikati na rupici za otkrivanje, tako da je konfokalna slika optički presjek uzorka, čime se prevladava nedostatak nejasne slike običnog mikroskopa.
Laserski konfokalni mikroskop Princip rada
