Laserski konfokalni skenirajući mikroskop
Laserski konfokalni skenirajući mikroskop (laserski konfokalni skenirajući mikroskop), koji koristi laser kao izvor svjetlosti za skeniranje, brzo skeniranje i slikanje točku po točku, liniju po liniju i površinu po liniju, skenirajući laser i zbirka fluorescencije dijele leću objektiva, a leća objektiva skenira žarišnu točku laserskog svjetla, koja je također trenutna točka snimanja materije. Budući da je valna duljina laserske zrake kratka, a zraka vrlo tanka, konfokalni laserski skenirajući mikroskop ima visoku razlučivost, koja je oko 3 puta veća od običnog optičkog mikroskopa. Nakon što se sustav jednom fokusira, skeniranje je ograničeno na jednu ravninu uzorka. Kada je dubina fokusiranja različita, mogu se dobiti slike različitih razina dubine uzorka. Ove informacije o slici pohranjene su u računalu. Računalnom analizom i simulacijom može se prikazati trodimenzionalna struktura uzorka stanice.
Zašto vam je potreban konfokalni mikroskop?
1. Nakon napora i poboljšanja naših velikih prethodnika, optički mikroskop je dosegao točku savršenstva. U stvari, obični mikroskopi mogu nam jednostavno i brzo pružiti prekrasne mikroskopske slike. Međutim, dogodio se događaj koji je donio revolucionarnu inovaciju u ovaj gotovo savršen svijet mikroskopa, a to je izum "laserskog skenirajućeg konfokalnog mikroskopa". Značajka ove nove vrste mikroskopa je da usvaja optički sustav koji samo izvlači informacije o slici na površini gdje je fokus koncentriran i vraća dobivene informacije u memoriju slike dok mijenja fokus, tako da se potpuna 3D informacija može prikazati dobiveno. Jaka slika inteligencije. Ovom metodom moguće je lako dobiti informacije o obliku površine koje se ne mogu potvrditi normalnim mikroskopom. Osim toga, za obične optičke mikroskope, "povećanje razlučivosti" i "produbljivanje dubine fokusa" su kontradiktorni uvjeti, posebno pri velikim povećanjima, ova kontradikcija je izraženija, ali u smislu konfokalnih mikroskopa, ovaj problem se lako rješava.
2. Prednosti konfokalnog optičkog sustava
Shematski dijagram laserskog konfokalnog mikroskopa
Konfokalni optički sustav vrši točkasto osvjetljavanje uzorka, a reflektirano svjetlo također prima točkasti receptor. Kada se uzorak postavi u fokusni položaj, gotovo sva reflektirana svjetlost može doprijeti do fotoreceptora, a kada je uzorak izvan fokusa, reflektirana svjetlost ne može doprijeti do fotoreceptora. Odnosno, u konfokalnom optičkom sustavu izlazi samo slika koja se poklapa sa žarišnom točkom, a svjetlosne točke i beskorisno raspršeno svjetlo bit će zaštićeni.
3. Zašto koristiti laser?
U konfokalnom optičkom sustavu uzorak se osvjetljava u točki, a reflektirano svjetlo također prima točkasti fotoreceptor. Stoga postaje neophodan točkasti izvor svjetlosti. Laseri su vrlo točkasti izvori svjetlosti. U većini slučajeva laserski izvori svjetlosti koriste se kao izvori svjetlosti za konfokalne mikroskope. Osim toga, karakteristike monokromatičnosti, usmjerenosti i izvrsnog oblika laserske zrake također su važni razlozi za njegovu široku primjenu.
4. Promatranje u stvarnom vremenu temeljeno na brzom skeniranju postaje moguće
Za lasersko skeniranje, vodoravni smjer usvaja akustični optički deflektor (AO element), a okomiti smjer usvaja servo elektronički kontrolirano zrcalo za skeniranje snopa (Servo Galvano-ogledalo). Budući da akusto-optička otklonska jedinica nema mehanički dio za vibracije, može izvoditi skeniranje velikom brzinom i moguće je promatranje na zaslonu monitora u stvarnom vremenu. Ova velika brzina snimanja vrlo je važna stavka koja izravno utječe na brzinu fokusiranja i dohvaćanja položaja.
