Metoda izrade mikroskopskih stakalca
Postoje tri metode izrade mikroskopskih stakalca:
1. Metoda razmaza
Metoda razmaza je metoda pripreme u kojoj se materijal ravnomjerno rasporedi po stakalcu.
Materijali razmaza uključuju jednostanične organizme, male alge, krv, bakterijske kulture, rastresita tkiva biljaka i životinja, gnijezda spermija, prašnike itd.
Prilikom razmazivanja treba obratiti pozornost na:
(1) Stakalce moraju biti čiste.
(2) Stakalce treba držati ravno.
3) Premaz mora biti jednoličan. Nanesite kapljicu tekućine za premazivanje desno od sredine stakalca i dobro je rasporedite oštricom noža za seciranje ili čačkalicom itd.
4) Premaz treba biti tanak. Upotrijebite drugo stakalce kao potiskivač, nježno gurnite s desna na lijevo po površini stakalca s kapljicom otopine za nanošenje (kut između dva stakalca treba biti 30 do 45 stupnjeva) i nanesite ravnomjerno tanak sloj.
5) Učvršćivanje. Ako je potrebna fiksacija, upotrijebite kemijski fiksator ili sušionu (bakterijsku) fiksaciju.
6) Bojenje. Koristite metilensko plavo za bakterije i Rachelinu mrlju za krv. Otopina za bojenje treba pokriti cijelu premazanu površinu.
7) Isperite. Upijte na upijajući papir ili ispecite na suho.
8) Zatvorite film. Za dugotrajno skladištenje koristite kanadski film za drvo.
2. Metoda prešanja filma
Metoda filma pod pritiskom je biološki materijal koji se stavlja između stakalca i pokrovnog lista, primjenom određenog pritiska, stanice tkiva će se razdvojiti. Metoda pripreme.
(1) uzeti materijal. Promatranje stanične diobe, stanične diobe treba odabrati bujne, svježe stanice tkiva kao materijale. Kao što su vrhovi korijena, meristematsko tkivo vrha stabljike, stanice koštane srži, prašnici (majčinske stanice peluda). Gnijezdo sperme (spermatogonije) i tako dalje.
(2) Učvršćivanje. Fiksacija materijala može se odrediti prema potrebi, odmah nakon promatranja filma pritiska materijala, ne može se napraviti zaseban fiksni tretman (i bojenje sinkrono); uzeti materijal ne odmah nakon pregleda, materijal se može fiksirati fiksativom (općenito alkoholno acetatnim fiksativom). Fiksirano 2 ~ 24 sata (ovisno o materijalu) nakon pranja s 95% etanolom, konzervirano u 70% etanolu, stanje pripravnosti.
(3) Disocijacija. Stanice nije lako raspršiti materijal otopinom za odvajanje hidrolizom (kao što je 1N HCl ili otopina klorovodične kiseline i alkohola), tretman, opći tretman 6 ~ 20 minuta, nakon disocijacije i ispiranja vodom prije bojenja.
(4) Bojenje. Postoji mnogo vrsta mrlja. Promatranje kromosoma obično se koristi za bojenje otopinom za bojenje magenta acetatom.
(5) Prešanje filma. Stavite materijal na predmetno stakalce, dodajte kap vode ili otopine za bojenje, pokrijte pokrovno stakalce i nježno pritisnite stakalce palcem.
(6) Promatranje. Nakon pritiskanja film se može promatrati pod mikroskopom.
