Principi i strukturne značajke fluorescentne mikroskopije
Fluorescencijski mikroskop je korištenje visoke svjetlosne učinkovitosti točkastog izvora svjetlosti, kroz sustav filtriranja boja za emitiranje određene valne duljine svjetlosti (kao što je ultraljubičasto 3650 ili ljubičasto-plavo 4200) kao pobudno svjetlo, pobuđivanje fluorescentnog materijala unutar uzorak emitira niz različitih boja fluorescencije, a zatim se povećava kroz objektiv i okulare za promatranje. Na taj način, u pozadini jakog kontrasta, čak i ako je fluorescencija vrlo slaba, lako ju je identificirati, visoka osjetljivost, uglavnom se koristi za proučavanje stanične strukture i funkcije te kemijskog sastava. Osnovna struktura fluorescentnog mikroskopa sastoji se od običnog optičkog mikroskopa plus nekih dodataka (kao što su izvor fluorescentnog svjetla, pobudni filtri, dvobojni separator snopa i blokirajući filtri, itd.). Fluorescentni izvor svjetlosti - općenito korištena ultravisokotlačna živina lampa (50-200W), koja može emitirati različite valne duljine svjetlosti, ali svaki fluorescentni materijal ima najjaču valnu duljinu pobude fluorescencije, tako da je potrebno dodati pobudne filtre (općenito ultraljubičasti, ljubičasti, plavi i zeleni pobudni filter), tako da samo određena valna duljina pobudnog svjetla kroz zračenje uzoraka, dok se drugo svjetlo apsorbira. Stoga je potrebno dodati pobudni filtar (obično ultraljubičasti, ljubičasti, plavi i zeleni pobudni filtar), tako da samo određena valna duljina pobudnog svjetla prolazi kroz uzorak, dok se ostalo svjetlo apsorbira. Kada je svaka tvar ozračena pobudnim svjetlom, emitira vidljivu fluorescenciju veće valne duljine od ozračene svjetlosti u vrlo kratkom vremenu. Fluorescencija ima specifičnost, općenito slabiju od ekscitacijske svjetlosti, kako bi se mogla promatrati specifična fluorescencija u leći objektiva iza koje je potrebno dodati filter za blokiranje (ili suzbijanje).
Njegova uloga je dvojaka:
Jedan je da apsorbira i blokira pobudno svjetlo u okularu, kako se ne bi poremetila fluorescencija i oštetilo oko.
Drugi je odabir i propuštanje određene fluorescencije, pokazujući određenu fluorescentnu boju. Dvije vrste filtara moraju se odabrati i koristiti zajedno.
