Razlozi zbog kojih se bakterije treba popraviti prije bojenja u eksperimentima s mikroskopijom:
Ubijanje ćelija lakše je obojenje.
Neka se bakterije pridržavaju staklenih tobogana i ne lako ih se opraju vodom.
Prilikom popravljanja potrebno je polako osušiti. Ako je potrebno ubrzati postupak, možete ga nekoliko puta osušiti s udaljenosti iznad plamena alkoholne svjetiljke. Ne osušite stakleni klizač dok se ne zagrije, u protivnom može oštetiti bakterijski život
Gram bojenje i mikroskopsko promatranje bakterija
Eksperimentalni princip
Načelo bojenja grama: različite reakcije bakterija na bojenje grama uzrokovane su razlikama u sastavu i strukturi njihovih staničnih stijenki. Stanična stijenka Gram pozitivnih bakterija uglavnom se sastoji od mreže peptidoglikana. Kada se tretira etanolom, dehidracija uzrokuje smanjenje veličine pora i propusnosti mrežne strukture, što otežava ispranje kristalnog ljubičastog jodnog kompleksa i zadržavanja unutar stanice. Nakon dekolorizacije i suprotstavljenog, plava ljubičasta boja početne boje i dalje se zadržava. Sloj peptidoglikana na staničnoj stijenci gram negativnih bakterija je tanak i ima visok sadržaj lipida. Stoga, kada se dekolorizira, lipid se otopi u etanolu (ili acetonu), povećavajući propusnost stanične stijenke i olakšavajući ispiranje kristalnog ljubičastog jodnog kompleksa. Nakon suprotnosti s kontrastanom, stanice su obojene crvenom bojom kontrastana. Princip mikroskopa: Moderni obični optički mikroskopi koriste dva skupa sustava leća, okulara i objektiva, za uvećanje i sliku, tako da se često nazivaju složenim mikroskopima. U optičkom sustavu mikroskopa, performanse objektivne leće je najvažnije, a povećanje naftne leće je najveće, što je najvažnije za mikrobiološka istraživanja. Dodavanje leće ulja između staklenog klizača i leće uglavnom je za povećanje svjetline osvjetljenja i povećanje razlučivosti mikroskopa. Korištenje ulja umjesto zraka kao medij za širenje svjetlosti smanjuje refrakciju ili ukupni odraz svjetlosti, što promatranu sliku čini jasnijom.
