Upotreba stereo fluorescentnog mikroskopa i mjere opreza
upute:
(1) Stavite list materijala na pozornicu.
(2) Uključite stabilizator napona fluorescentnog mikroskopa. Zatim pritisnite startnu grupu za paljenje UV lampe i nemojte je gasiti u roku od 15 minuta, niti je ponovno pokretati unutar 3 minute nakon što se isključi.
(3) Okrenite pobudni filtar na v, filtar za odvajanje boja na v i odaberite filtar za blokiranje od 495 ili 475 nm.
(4) Odaberite mikroskop s fluorescentnim objektivom uvFL40, uvFL100 za mikroskopsko ispitivanje.
(5) Dodajte nefluorescentno ulje na stakalce, prvo upotrijebite 40 x, a zatim upotrijebite 100 x fokusni mikroskop za provjeru. Pojavljuje se fluorescencija.
(7) Budući da fluorescencija fluorescentnih tvari postupno slabi s vremenom kada su ozračene ultraljubičastim svjetlom, potrebno je često mijenjati vidno polje tijekom mikroskopskog pregleda.
(8) mikroskopi s malim povećanjem uvFL10 ili uvFL20 također se mogu koristiti za pregled materijala (ne dodaje se fluorescentno ulje kada se koriste leće male snage).
Metoda snimanja fluorescentne slike:
Fluorescentna slika koju vidi fluorescentni mikroskop ima i morfološke karakteristike i fluorescentnu boju i svjetlinu. Prilikom ocjenjivanja rezultata, to dvoje se mora kombinirati za sveobuhvatnu prosudbu. Rezultati se bilježe na temelju subjektivnih pokazatelja, odnosno vizualnog opažanja radnika. Kao opće kvalitativno opažanje, u osnovi pouzdano. S razvojem tehnologije i znanosti, objektivni indikatori se koriste za bilježenje rezultata prosudbe u različitim stupnjevima, kao što su stanični spektrofotometri, analizatori slike i drugi instrumenti. Međutim, rezultati zabilježeni ovim instrumentima također se moraju kombinirati sa subjektivnim prosudbama.
Fotografiranje fluorescentnim mikroskopom vrlo je potrebno za snimanje fluorescentnih slika. Budući da je fluorescenciju lako izblijediti i oslabiti, potrebno je bilježiti rezultate u stvarnom vremenu. Metoda je u osnovi ista kao kod obične fotomikrografije. Samo trebate koristiti fotoosjetljivi film velike brzine kao što je ASA200 ili noviji ili 24. noviji. Budući da ultraljubičasto svjetlo ima snažan učinak na gašenje fluorescencije, kao što su FITC markeri, svjetlina fluorescencije će se smanjiti za 50 posto kada se ozrači ultraljubičastim svjetlom 30 sekundi. Stoga, ako je brzina ekspozicije prespora, fluorescentna slika se ne može snimiti. Fluorescentni mikroskopi za opće istraživanje imaju poluautomatske ili potpuno automatske fotomikrografske uređaje.
Mjere predostrožnosti:
(1) Radite strogo u skladu sa zahtjevima tvorničkih uputa za fluorescentni mikroskop i nemojte mijenjati program po želji.
(2) Pregled treba obaviti u tamnoj prostoriji. Nakon što uđete u mračnu komoru, spojite napajanje i upalite živinu lampu ultravisokog pritiska 5-15 minuta. Nakon što se jaka svjetlost iz izvora svjetlosti ustali, oči se potpuno adaptiraju na tamnu komoru, a zatim počinju promatrati jedinku.
(3) Kako biste spriječili da ultraljubičaste zrake oštećuju oči, potrebno je nositi zaštitne naočale prilikom podešavanja izvora svjetlosti.
(4) Vrijeme pregleda poželjno je 1-2 sati svaki put. Ako prelazi 90 minuta, intenzitet svjetla živine žarulje ultravisokog tlaka postupno će se smanjivati i fluorescencija će oslabjeti; nakon što je uzorak ozračen ultraljubičastim zrakama 3-5 minuta, fluorescencija će također biti značajno oslabljena; stoga ne bi smio premašiti najviše 2-2 sati. 3h.
(5) Životni vijek izvora svjetlosti fluorescentnog mikroskopa je ograničen, a uzorke treba pregledavati zajedno kako bi se uštedjelo vrijeme i zaštitio izvor svjetlosti. Kad je vrijeme vruće, potrebno je dodati ventilatore za raspršivanje topline, a nove žarulje treba bilježiti od početka njihova korištenja. Ako je želite ponovno koristiti nakon što se lampa ugasi, morate pričekati da se žarulja dovoljno ohladi prije nego što je upalite. Izbjegavajte paljenje izvora svjetlosti nekoliko puta dnevno.
(6) Promatrajte uzorak odmah nakon bojenja jer će fluorescencija s vremenom postupno slabiti. Ako je uzorak pohranjen u polietilenskoj plastičnoj vrećici na 4 stupnja, vrijeme slabljenja fluorescencije može se odgoditi i može se spriječiti isparavanje sredstva za postavljanje.
(7) Standard prosudbe svjetline fluorescencije: općenito se dijeli na četiri razine, to jest, "jedan" - može se vidjeti nikakva ili slaba fluorescencija. " plus "—Može se vidjeti samo jasno vidljiva fluorescencija. " plus plus "—Vidljivo i svijetlo
