Na rad mikroskopa utječe nekoliko čimbenika
Glavni čimbenik koji određuje učinkovitost Nikon mikroskopa je njihova rezolucija, također poznata kao rezolucija ili rezolucija. Međutim, fizičke veličine kao što su povećanje i jasnoća usko su povezane s razlučivošću Nikon mikroskopa
Znamo da su mikroskopi složeni koaksijalni optički sustavi. Ovaj se sustav sastoji od glavnih slikovnih elemenata kao što su izvor svjetlosti, svjetlosna traka otvora blende, reflektor i leća objektiva. Okular je samo optička komponenta koja izravno povećava i projicira objekt na zaslon (uključujući ljudsku mrežnicu). Izvor svjetlosti može biti nekoherentni izvori poput sunčeve svjetlosti ili svjetla, ili koherentni izvori poput točkaste svjetlosti.
U 1870-ima, njemački učenjak E. Abbe postavio je temelje za teoriju mikroskopske slike. Moderna fizička optika koristi ažurirane eksperimente za daljnje razjašnjavanje suštine principa transformacije spektra u Abbeovoj teoriji slikanja (optika transformacije Fourierovog spektra).
Ključna komponenta slike u optičkom putu mikroskopa je leća objektiva. Postoje bezbrojne ravnine između izvora svjetlosti i prednje leće leće objektiva, s odgovarajućim konjugiranim ravninama iza leće objektiva. Međutim, prema Abbeovoj teoriji, ravnina objekta O u mikroskopu odgovara konjugiranoj ravnini O, koja je ravnina slike O, i konjugiranoj ravnini I, koja odgovara izvoru svjetlosti I. Ovo su dva važna para ravnina u sustav slikanja. Da bismo razumjeli proces snimanja Nikon mikroskopijom, moramo proučavati optičke procese koji se događaju na ove dvije odgovarajuće konjugirane ravnine.
Unutar raspona kuta upadne zrake ograničene svjetlosnom trakom otvora blende u mikroskopu, ona se izravno transformira u osvjetljavajući izvor svjetlosti za osvjetljavanje uzorka kroz kondenzator. Svjetlo na ravnini snopa otvora blende oblikuje slike na ili blizu žarišne ravnine iza leće objektiva. Abbe je ovu sliku nazvao prvom slikom na putu mikroskopske slike. Ne možemo zanemariti važnost kvalitete prve slike. Prvo, svjetlosna traka otvora blende ograničava potrebni upadni kut za prikaz snopa svjetlosti. To znači da se time određuje prikladnija svjetlina za promatranje predmeta pod mikroskopom. Drugo, svjetlo za slikanje na različitim ravninama trodimenzionalne strukture uzorka također je određeno ovime. Ukratko, umjereni kontrast slike objekta i jasnoća konture slike objekta u Nikonovom mikroskopu određeni su time.
Umetnemo li preparat u stazu snimanja Nikon mikroskopa, oštetit će se prvi sustav snimanja. Slika svjetlosne trake otvora blende više se ne može vidjeti u zrcalnoj cijevi. U ovom trenutku detalji uzorka postaju osvijetljeni i prikazani na mrežnici ili ekranu iza okulara. Abbe je ovo nazvao drugom slikom mikroskopa. Proces snimanja detalja uzorka ne može se objasniti geometrijskom optikom. Budući da se svjetlo za snimanje lomi, dvolomi, lomi i raspršuje na ovoj ravnini, a distribucija intenziteta svjetla mijenja se detaljima uzorka. Svjetlosna informacija na ravnini Fourierovog spektra se transformira i projicira na ekran. U različitim optičkim mikroskopima, temeljenim na ovom principu, koriste se različite interferencijske komponente za mapiranje detalja uzorka u objekte s kontrastnim svjetlom i tamom ili kontrastom tame i svjetla. Ovo je princip snimanja raznih mikroskopa o kojem ćemo detaljnije raspravljati u budućnosti.
