Uloga svakog filtra u fluorescentnoj mikroskopiji
Najvažniji problem kod fluorescentne mikroskopije je kombinacija filtara, a i filtar za pobudu i filtar za zaštitu moraju biti prikladni za promatrano fluorescentno tijelo i međusobno usklađeni. Za određene specifične svrhe, ako postoji pogreška u odabiru filtra, to može dovesti do nesporazuma, pa čak i netočnih rezultata. Dostignuća tehnologije fluorescentne mikroskopije i korištenje visokokvalitetnih filtera i genijalnih grupa filtera su neodvojivi. Postoji nekoliko vrsta filtara za fluorescentnu mikroskopiju.
1. Filter koji apsorbira toplinu
Filtar koji apsorbira toplinu neophodan je filtar za sprječavanje da toplinsko zračenje u spektru izvora svjetlosti ošteti grupu optičkih uređaja. Rani napredni mikroskopi bili su opremljeni bocama u obliku bubnja koje su mogle držati destiliranu vodu kao uređaj za apsorbiranje topline. Moderni istraživački mikroskopi velikih razmjera opremljeni su staklenim filtrima koji apsorbiraju toplinu u rasvjetnim kutijama ili komorama izvora svjetlosti, koje su prozirne, blago žute staklene ploče. Leitzovi filtri KG1 (2 mm) i BG38 (4 mm) mogu propuštati gotovo sve spektre ultraljubičastog i vidljivog svjetla, što ih čini filtrima sa svjetlosnim protokom do 98%. On samo selektivno apsorbira linije infracrvenog fototermalnog zračenja.
2. Filtar uzbude
Ekscitacijski filtri mogu selektivno apsorbirati spektralne linije dugih valnih duljina i propuštati samo ultraljubičasto svjetlo. Filtri za ljubičasto, plavo i zeleno svjetlo su filtri pobude. Zeiss, Reichert, Olympus B-serija, G-serija, BG serija, Shott UG serija, Opton H, G, BP serija, Leitz BP serija i drugi filtri su pobudni filtri.
3. Filter za blokiranje
Blokirajući filtar je filtar koji selektivno apsorbira spektralne linije kratkih valnih duljina i infracrveno zračenje, omogućujući promatraču da vidi fluorescenciju koju emitira predmet testiranja, dok štiti rožnicu od UV oštećenja.
4. Filter za odvajanje svjetla u boji
Filtar za odvajanje svjetla u boji je filtar koji reflektira svjetlo pobude na predmet koji se testira, uzrokujući da objekt emitira fluorescenciju, a zatim prenosi fluorescenciju na okular. Ova vrsta filtra može se koristiti samo u koncentratorima padajućeg snopa, dok fluorescentna mikroskopija prijenosnog svjetla ne zahtijeva odvajanje boja.
5. Filter za smetnje
Interferencijski filtar je vrsta pobudnog filtra visokih performansi. To je filtar napravljen slaganjem nekoliko tankih metalnih filmova između dvije polirane staklene ploče. Indeks loma svakog tankog metalnog filma je različit, tako da se spektralne linije različitih valnih duljina izvora svjetlosti opetovano reflektiraju na svakom metalnom filmu, uzrokujući da se neke valne duljine spektralnih linija ponište zbog destruktivne interferencije, dok su druge ojačane aditivne smetnje i prenosi se kroz. To rezultira filtrom s uskim spektrom transmisije, širinom pola vrha od samo 6~20nm i propusnošću od 60%~70%.
