Što je sustav optičkog puta fluorescentnog mikroskopa?
Pod mikroskopom, zbog optičkih svojstava pojedinih tvari, obični uspravni mikroskopi ne mogu jasno vidjeti njihovu unutarnju strukturu, a imaju još jednu karakteristiku, poput nekih tvari u stanicama, poput klorofila, koji mogu emitirati fluorescenciju nakon izlaganja ultraljubičastom zračenju ; Neke tvari same po sebi možda neće emitirati fluorescenciju, ali ako su obojene fluorescentnim bojama ili fluorescentnim antitijelima, također mogu emitirati fluorescenciju pod ultraljubičastim zračenjem. Korištenjem optičkih svojstava ovih tvari, razvijena je profesionalna oprema za mikroskopski prikaz, naime fluorescentna mikroskopija. Fluorescentna mikroskopija je alat za kvalitativno i kvantitativno istraživanje takvih tvari. Točna definicija fluorescentnog mikroskopa odnosi se na mikroskop koji odabire određenu valnu duljinu pobudne svjetlosti koju emitira visokotlačna živina lampa ili sličan izvor svjetlosti, pobuđuje određene tvari označene fluorescentnim bojama u stanicama da emitiraju fluorescenciju i promatra status distribucije određene komponente u stanicama. Mogu se provesti i polukvantitativna mjerenja. Fluorescentna mikroskopija jedan je od alata koji se koristi za kvalitativno i kvantitativno istraživanje takvih tvari.
Podešavanje sustava osvjetljenja mikroskopa treba osigurati da vidno polje mikroskopa može biti ravnomjerno i potpuno osvijetljeno. Kada se mikroskop prvi put instalira i otklanjaju greške, sustav osvjetljenja mora biti pravilno podešen. Ovo je važno sredstvo i osnovni uvjet za ispravnu upotrebu mikroskopa i dobivanje točnih i pouzdanih rezultata. Osim toga, pravilno ovladavanje prilagodbom sustava osvjetljenja neophodan je korak nakon zamjene žarulje izvora svjetlosti tijekom uporabe mikroskopa, a također je i neophodan način za povremeno testiranje performansi mikroskopa tijekom svakodnevne uporabe. Postoje sljedeće razlike između fluorescentne mikroskopije i obične mikroskopije:
1. Metoda osvjetljavanja obično je kapljična, gdje se izvor svjetlosti projicira na uzorak kroz leću objektiva;
2. Izvor svjetlosti je ultraljubičasto svjetlo, kraće valne duljine i veće rezolucije od običnih mikroskopa;
3. Postoje dva posebna filtra, onaj ispred izvora svjetlosti koristi se za filtriranje vidljive svjetlosti, a onaj između okulara i objektiva koristi se za filtriranje ultraljubičastih zraka radi zaštite ljudskog oka.
Fluorescentna mikroskopija također je vrsta optičkog mikroskopa, a glavna razlika je u različitim valnim duljinama pobude između njih. To određuje razlike u strukturi i upotrebi između fluorescentne mikroskopije i obične optičke mikroskopije.
Fluorescentna mikroskopija temeljni je alat za imunofluorescentnu citokemiju. Sastoji se od glavnih komponenti kao što su izvor svjetlosti, sustav filtarske ploče i optički sustav. To je korištenje određene valne duljine svjetlosti za pobuđivanje uzorka i emitiranje fluorescencije te promatranje fluorescentne slike uzorka kroz pojačanje sustava objektiva i okulara. Široko se koristi u područjima biologije i medicinskih istraživanja.
