Koje su specifikacije uzorka potrebne za svjetlosnu mikroskopiju?
U postupku pripreme uzorka optičkog mikroskopa, debljina kriške uzorka je između 2-25um; debljina kriške elektronskog mikroskopa je unutar 50-100nm (osim za visokonaponski elektronski mikroskop, čija debljina uzorka može doseći 1 um), tako da korištena metoda rezanja nije ista.
Što se tiče nosača, nosač sekcije optičkog mikroskopa je predmetno staklo, dok je nosač sekcije elektronskog mikroskopa rešetka.
Što se tiče fiksacije, rezovi optičkog mikroskopa fiksiraju se složenim fiksativom, dok se rezovi elektronskog mikroskopa višekratno fiksiraju jednim fiksativom.
Što se tiče bojanja, bojanje optičkih uzoraka je relativno jednostavno. Prema različitim uzorcima za promatranje i vrstama optičkih mikroskopa, obično je dovoljno obojiti nekim fiksiranim sredstvima za bojenje. Postoje mnoge i komplicirane metode za ponovno bojenje uzoraka elektronskog mikroskopa, kao što su negativno bojenje, bojenje srebrom i tako dalje.
Što se tiče ugradnje, parafin, kolodij, želatina itd. koriste se kao sredstva za ugradnju za rezove optičkog mikroskopa; epoksidna smola, polistirenska smola, izobutilenska smola i smola topljiva u vodi koriste se kao sredstva za ugradnju za sekcije elektronskog mikroskopa.
Kako bi se osiguralo da vidno polje mikroskopa može biti ravnomjerno i potpuno osvijetljeno, optički sustav osvjetljenja mora se podesiti kada se mikroskop prvi put instalira i otklanjaju pogreške. Ovo je važno sredstvo i najosnovniji način za ispravnu upotrebu mikroskopa i dobivanje točnih i pouzdanih rezultata. zahtjevi. Osim toga, pravilno ovladavanje prilagodbom sustava optičkog puta osvjetljenja neophodan je korak nakon zamjene žarulje izvora svjetlosti tijekom uporabe mikroskopa, a također je i neophodan način za provjeru performansi mikroskopa s vremena na vrijeme tijekom dnevnog koristiti. Podešavanje optičkog puta osvjetljenja mikroskopa uglavnom uključuje sljedeće četiri stavke: 1. Preliminarno podešavanje komore svjetiljke izvora svjetlosti izvan mikroskopa ① Prvo otvorite kućište komore lampe, pritisnite opružnu kopču da stavite halogenu žarulju u utičnicu i izbjegavajte izravan kontakt sa žaruljom prstima tijekom postavljanja (možete ih odvojiti mekom krpom ili papirom) kako biste izbjegli da na žarulji ostanu otisci prstiju i druga prljavština, što će utjecati na vijek trajanja žarulje. ②Stavite kućište svjetiljke na stol, nakon što uključite struju, pomoću posebnog odvijača namjestite rupu gumba za fokusiranje na žarulji (označeno s "←→"), tako da žarna nit strši na zid 1-2 m, a slika niti je podešena. Zatim podesite visinu žarulje i podesite rupu za navoj (označenu s "──") kako bi položaj žarne niti bio odgovarajući; zatim podesite lijevi i desni položaj žarulje kako biste prilagodili otvor za vijak (označen s "──") kako bi lijevi i desni položaj žarne niti bili odgovarajući.
2. Svrha provjere i ispravljanja položaja rasvjetnog tijela izvora svjetlosti (žarna nit) u mikroskopu je podesiti kraj slike iluminatora točno u vidno polje leće objektiva i osigurati da vidno polje mikroskop je potpuno i jednoliko osvijetljen iz perspektive izvora svjetlosti. Rasvjeta, koja je preduvjet za podešavanje Kuhler sustava rasvjete. Potrebni osnovni alati: Teleskop za centriranje opremljen je prilikom kupnje mikroskopa. ① Isključite matirano stakleno kućište kućišta lampe i vratite kućište lampe na mikroskop. ② Odaberite leću objektiva 10×, uključite program izvora svjetlosti da pronađete uzorak i jasno ga fokusirate, a zatim upotrijebite leću objektiva 40× da jasno fokusirate uzorak (leća objektiva 40× Možete vidjeti cijelu sliku žarne niti ); ③ Otvorite dijafragmu otvora blende i dijafragmu polja kondenzatora do maksimuma; ④ Odspojite jedan od okulara, zamijenite ga teleskopom za centriranje, uhvatite bijeli dio, rastegnite crni okular drugom rukom. Možete vidjeti sliku niti u vidnom polju; ⑤ Ako položaj filamenta nije prikladan, podesite rupu "──" za podešavanje slike filamenta u vodoravnom smjeru i podesite rupu "──" za podešavanje slike filamenta u okomitom smjeru dok ne podesite sliku filamenta na svjetlosnu kružnu sliku koja samo ispunjava otvor leće objektiva; ⑥ Nakon podešavanja, umetnite mat stakleni omotač natrag u prvobitni položaj, isključite teleskop za centriranje i vratite okular za sljedeće podešavanje. Gore spomenutu prilagodbu komore svjetlećeg izvora svjetla izvan mikroskopa i provjeru položaja svjetlećeg tijela izvora svjetla unutar mikroskopa potrebno je izvršiti samo kada je mikroskop prvi put instaliran i otklonjene greške te kada je žarulja zamijenjena , a mikroskop se ne može nasumično podešavati tijekom korištenja mikroskopa. U slučaju zabune, može se vratiti u izvorno stanje prema gornjim koracima.
3. Ispravno podešavanje Kohlerovog sustava osvjetljenja Jedan od glavnih zadataka pravilnog podešavanja mikroskopa je podešavanje sustava optičkog puta osvjetljenja, a ključno je podešavanje Kohlerovog sustava osvjetljenja. Svaka osoba koja koristi mikroskop, posebno ona koja radi mikrofotografije, trebala bi imati određeno razumijevanje i ovladati principom Kuhlerovog sustava osvjetljenja i njegovih koraka prilagodbe kako bi u potpunosti iskoristila funkcije mikroskopa i napravila fotografije. Fotografije koje izađu mogu biti dosljednije i savršenijeg učinka. Načelo Kohlerovog sustava osvjetljenja je jednostavno: svjetlost koju emitira bilo koja točka na izvoru svjetla može osvijetliti vidno polje mikroskopa, a svjetlost koju emitira svaka točka na izvoru svjetla se prikuplja, au polju pogled na mikroskop Postiže se vrlo puno i ravnomjerno osvjetljenje. Svrha podešavanja Kuhlerovog sustava osvjetljenja je dobiti jednoliku i dovoljnu rasvjetu za promatrano vidno polje, te spriječiti da zalutala svjetlost utječe ili interferira sa slikovnim sustavom, kako bi se izbjeglo zamagljivanje na filmu tijekom fotografije. Potrebne komponente za Kohlerov rasvjetni sustav s visokom prilagodbom: dijafragma polja, sustav sabirnih leća koji se može podešavati po osi. ① Odaberite 10× leću objektiva i 10× okular ② Stavite prednju leću kondenzora u optički put, podesite dijafragmu otvora blende na umjereni položaj (ne preveliku ili malu), zatim podignite kondenzor do gornji položaj i podesite okretnu ploču kondenzatora u položaj svijetlog polja "J" ③ Podesite dijafragmu polja na minimum (0,1)
④ Stavite zapečaćeni biološki uzorak na postolje, uključite izvor svjetla i jasno fokusirajte
⑤ U vidnom polju bit će djelomično osvijetljeno područje ili svijetla točka, koja je zamućena slika dijafragme polja, u kojoj se detalji uzorka mogu jasno vidjeti; izvan njega je tamnije vidno polje, koje ne mora nužno jasno vidjeti detalje uzorka
⑥Lagano namjestite kondenzator prema dolje, tako da se svijetla točka u vidnom polju postupno smanjuje i postupno postaje jasna poligonalna slika, što je jasna slika dijafragme polja;
⑦Općenito, poligonalna slika nije u središtu vidnog polja i potrebno je podesiti par vijaka za centriranje kondenzora kako bi se poligonalna slika dijafragme polja prilagodila središnjem položaju;
⑧Postupno otvarajte dijafragmu vidnog polja kako bi slika poligona postala upisani poligon vidnog polja i dodatno provjerite status poravnanja. Ako poravnanje nije idealno, nastavite s finim podešavanjem vijka za poravnanje;
⑨Lagano otvorite dijafragmu vidnog polja, tako da njena poligonalna slika samo nestane na rubu vidnog polja. Do sada je završena prilagodba Kohler sustava rasvjete. Nakon podešavanja Kohlerovog sustava osvjetljenja, cijelo vidno polje je ravnomjerno osvijetljeno, a snimljene mikrofotografije su svijetle i jasne s normalnim kontrastom.
