Zašto trebate koristiti konfokalni mikroskop?
1. Optički mikroskopi dostigli su stanje savršenstva zahvaljujući naporima i poboljšanjima naših velikih prethodnika. U stvari, obični mikroskopi mogu nam jednostavno i brzo pružiti prekrasne mikroskopske slike. Međutim, dogodio se događaj koji je donio revolucionarnu inovaciju u ovaj gotovo savršen svijet mikroskopije. Ovo je bio izum "laserskog skenirajućeg konfokalnog mikroskopa". Karakteristika ove nove vrste mikroskopa je da koristi optički sustav koji izvlači informaciju o slici samo na površini gdje je fokus fokusiran, a dobivenu informaciju vraća u memoriju slike uz promjenu fokusa, čime se dobiva potpuna 3D informacija. Živopisna slika inteligencije. Ovom metodom lako se mogu dobiti informacije o obliku površine koje se ne mogu potvrditi normalnim mikroskopom. Osim toga, za obične optičke mikroskope, "povećanje razlučivosti" i "produbljivanje dubine fokusa" su sukobljeni uvjeti, posebno pri velikim povećanjima. Međutim, u konfokalnoj mikroskopiji ovaj problem se lako rješava.
2. Prednosti konfokalnog optičkog sustava
Konfokalni optički sustav vrši točkasto osvjetljavanje uzorka, a reflektirano svjetlo također koristi točkasti receptor za primanje svjetla. Kada se uzorak postavi u položaj fokusa, gotovo sva reflektirana svjetlost može doprijeti do fotoreceptora. Kada je uzorak izvan fokusa, reflektirana svjetlost ne može doprijeti do fotoreceptora. Drugim riječima, u konfokalnom optičkom sustavu izlazi samo slika koja se podudara s fokusom, a svjetlosne točke i beskorisno raspršeno svjetlo bit će zaštićeni.
3. Zašto koristiti laser?
U konfokalnom optičkom sustavu uzorak se osvjetljava u točki, a reflektirana svjetlost također se prima pomoću točkastog fotoreceptora. Stoga postaju potrebni točkasti izvori svjetlosti. Laseri su vrlo točkasti izvori svjetlosti. U većini slučajeva izvor svjetlosti konfokalnih mikroskopa koristi laserske izvore svjetlosti. Osim toga, karakteristike lasera kao što su monokromatičnost, usmjerenost i odličan oblik snopa također su važni razlozi za njegovu široku primjenu.
4. Promatranje u stvarnom vremenu temeljeno na brzom skeniranju postaje moguće
Za lasersko skeniranje koristi se akustični optički deflektor (AO element) u horizontalnom smjeru i servo električno kontrolirano ogledalo za skeniranje snopa (Servo Galvano-zrcalo) u vertikalnom smjeru. Budući da akustičko-optička otklonska jedinica nema mehanički vibracijski dio, može skenirati velikom brzinom, omogućujući promatranje u stvarnom vremenu na zaslonu za praćenje. Velika brzina ovakvog snimanja vrlo je važna stavka koja izravno utječe na brzinu fokusiranja i dohvaćanja položaja.
5. Odnos između položaja fokusa i svjetline
U konfokalnom optičkom sustavu, svjetlina je maksimalna kada je uzorak pravilno postavljen na poziciju fokusa, a njegova svjetlina će se naglo smanjiti ispred i iza njega (puna linija na slici 4). Ova osjetljiva selektivnost žarišne ravnine također je princip iza određivanja smjera visine i širenja dubine fokusa konfokalnog mikroskopa. Nasuprot tome, normalni optički mikroskop nema očite promjene svjetline prije i nakon položaja fokusa (točkasta linija na slici 4).
6. Visoki kontrast i visoka rezolucija
U običnim optičkim mikroskopima, reflektirano svjetlo od dijela koji nije u fokusu interferirat će i preklapati se s dijelom za fokusiranje slike, što će rezultirati smanjenjem kontrasta slike. Nasuprot tome, u konfokalnom optičkom sustavu, zalutala svjetlost izvan fokusa i zalutala svjetlost unutar leće objektiva gotovo su u potpunosti uklonjene, tako da se može dobiti slika s vrlo visokim kontrastom. Osim toga, budući da svjetlost dvaput prolazi kroz leću objektiva, točkasta slika je izoštrena, što također poboljšava moć razlučivosti mikroskopa.
