Primjena i uporaba principa fluorescentnog mikroskopa
Načela i strukturne karakteristike fluorescentnih mikroskopa: fluorescentni mikroskopi koriste točkasti izvor svjetlosti s visokom svjetlosnom učinkovitošću za emitiranje svjetlosti određene valne duljine (kao što je ultraljubičasto svjetlo 3650 in ili ljubičasto-plavo svjetlo 4200 in) kroz sustav filtara u boji kao pobudno svjetlo za pobuditi fluorescenciju u uzorku. Nakon što tvar emitira fluorescenciju različitih boja, promatra se kroz povećanje objektiva i okulara. Na taj način, pod jakom kontrastnom pozadinom, čak i ako je fluorescencija vrlo slaba, lako ga je identificirati i ima visoku osjetljivost. Uglavnom se koristi za proučavanje stanične strukture i funkcije kao i kemijskog sastava. Osnovna struktura fluorescentnog mikroskopa sastoji se od običnog optičkog mikroskopa plus nekih dodataka (kao što je fluorescentni izvor svjetlosti, pobudni filtar, dvobojni razdjelnik snopa, blokirajući filtar itd.). Fluorescentni izvor svjetlosti - općenito koristi živinu žarulju ultravisokog tlaka (50 do 200 W), koja može emitirati svjetlost različitih valnih duljina, ali svaka fluorescentna tvar ima valnu duljinu pobude koja proizvodi najjaču fluorescenciju, tako da postoji filtar za pobudu ( Općenito postoje ultraljubičasti, ljubičasti, plavi i zeleni ekscitacijski filtri), koji dopuštaju samo ekscitacijskoj svjetlosti određene valne duljine da prođe i osvijetli uzorak, dok svu ostalu svjetlost apsorbira. Nakon što je svaka tvar ozračena pobudnim svjetlom, emitira vidljivu fluorescenciju s dužom valnom duljinom od valne duljine ozračivanja u vrlo kratkom vremenu. Fluorescencija je specifična i općenito je slabija od ekscitacijske svjetlosti. Za promatranje specifične fluorescencije potreban je blokirajući (ili suzbijajući) filtar iza leće objektiva. Ima dvije funkcije: jedna je apsorbirati i blokirati ulazak pobudne svjetlosti u okular kako bi se izbjeglo ometanje fluorescencije i oštećenje očiju; drugi je odabir i dopuštanje specifičnoj fluorescenciji da prođe kako bi se pokazala određena fluorescencijska boja. Dva filtra moraju se odabrati i koristiti zajedno.
