Biološki mikroskop na volumenu bloka tkiva
Biološki mikroskop s kondenzatorom može pomicati kondenzator gore-dolje kako bi njegova svjetlina bila umjerena, a također može promijeniti otvor blende analizatora varijabilnog svjetla kako bi se postigla umjerena svjetlina od 9b. Ako je svjetlo na suncu, kondenzator se može podići na odgovarajući način, a otvor blende varijabilnog optičkog šuma može se na odgovarajući način povećati. Ako je svjetlo prejako, kondenzor se može odgovarajuće spustiti, a otvor raskrižja može se odgovarajuće smanjiti. Ako se i dalje osjećate blještavo u ovom slučaju, možete odabrati odgovarajući filter i postaviti ga na nosač ispod kondenzatora. Ova tussah može dobiti svjetlinu koja vas zadovoljava. Naravno, potrebno je steći iskustvo nakon određenog razdoblja vježbe u podešavanju gornjeg i donjeg položaja kondenzora za promjenu veličine otvora optičkog očitanja i odabir odgovarajućih filtara.
Vrlo važan problem biomikroskopa je da se sa sadržajem od 65 elemenata u svakom dijelu nakon sušenja smrzavanjem i ugradnje smole (FD) i sušenja smrzavanjem mora pažljivo rukovati, kako se ne bi oštetile stanice koje se promatraju i analiziraju. Budući da rendgenska mikroanaliza ne samo da uključuje mnogo koraka, već i puno košta, vrlo je žalosno donijeti pogrešan zaključak ako su analizirane stanice oštećene stanice ili mrtve stanice nakon dugotrajnog i višestupanjskog tretmana. Na primjer, stanice miokarda razdvojene tretmanom kolagenazom imaju dva oblika, jedan je dugački štapić, a drugi je okrugao. Potonja je umiruća stanica koja je oštećena tijekom odvajanja stanica.
Sadržaj i raspodjela elektrolita u ove dvije vrste stanica vrlo su različiti pod biološkim mikroskopom. Na je vrlo visok, a K vrlo nizak u okruglim stanicama miokarda, a koncentracija Ca u linearnim dendritima je vrlo visoka. U usporedbi s drugim analitičkim metodama, dokazano je da su visoki Na i niski K u kružnim stanicama i visoki ca u mitohondrijima rezultat oštećenja stanične membrane tijekom razdvajanja stanica. Metoda hladne fiksacije stanica i tkiva često je njihova fiksacija prvo kaljenjem, a zatim pohranjivanjem u tekući dušik. Fiksacija kaljenjem je vrlo važna za učinak očuvanja. Žive stanice ili svježa tkiva bogata su vodom. Pri kaljenju se često događa da se dijelovi stanica ili tkiva koji su u izravnom kontaktu s krioprotektantima (osobito kod kaljenja tekućim dušikom) najprije zamrznu i fiksiraju te na taj način formiraju "ljusku" koja otežava zamrzavanje i fiksiranje središnjeg dio stanica. Stoga se pri izradi rendgenske mikroanalize često ustanovi da se u središtu većih stanica nalaze kristali leda. Kako bi se to spriječilo, kao sredstvo za hlađenje koristi se tvar s točkom taljenja višom od one tekućeg dušika, ali temperaturom sušenja nižom od 806C. Postoji mnogo takvih tvari, ali najlakše dostupna je koncentrirani propan (vrelište-42．120c, talište-187．10c, molekularna težina-44.1), koji ima najveća brzina hlađenja. Ali njegov nedostatak je zapaljivost.
Biološki mikroskop može staviti mišićno vlakno na poseban okvir, a kada se mišićno vlakno skupi do određene faze i treba ga fiksirati, mlaznica se odmah pokreće, tako da se tekući propan raspršuje na mišićno vlakno kako bi se ugasilo i učvrstilo to. Zatim se mišićna vlakna vade zajedno sa rešetkom i stavljaju u tekući dušik. Ako su krvne stanice ili odvojene stanice fiksirane, prvo centrifugirajte na maloj brzini da koncentrirate stanice, premjestite stanice u srebrnu malu epruvetu dobre toplinske vodljivosti i stavite malu epruvetu u tekući propan radi zamrzavanja i fiksiranja. Prilikom fiksiranja pankreasa štakora u Hall laboratoriju, dva čelična bloka prethodno su ohlađena tekućim helijem (ili tekućim dušikom), a dva bakrena bloka postavljena su kliještima ispred i iza gušterače, tako da su tete kaljene i fiksirane. Tkivo ili stanice mogu se pohraniti dugo vremena nakon što su ugašene i fiksirane te prebačene u tekući dušik.
