Metode i mjere opreza pri uporabi fluorescentnog mikroskopa
Način upotrebe:
(1) Postavite list materijala na nosač.
(2) Uključite regulator napona fluorescentnog mikroskopa. Zatim pritisnite startnu grupu za paljenje UV lampa se ne smije isključiti 15 minuta i ne smije se ponovno pokrenuti 3 minute nakon što se isključi.
(3) Okrenite pobudni filtar na v, dikroični film na v, odaberite 495 ili 475 nm blokirajući filtar.
(4) Odaberite uvFL40, uvFL100 fluorescentnu mikroskopiju s objektivom.
(5) Dodajte nefluorescentno ulje na stakalce, prvo 40 x, a zatim 100 x fokusiranje mikroskopije. Prikaži fluorescenciju.
(7) Budući da fluorescentni materijal ultraljubičastim zračenjem s rastom fluorescencije postupno slabi tijekom vremena, tako da mikroskopski pregled treba često mijenjati vidno polje.
(8) također može koristiti uvFL10 ili uvFL20 mikroskopski materijal s malim povećanjem (s malim povećanjem bez dodavanja nefluorescentnog ulja).
Metoda snimanja fluorescentne slike:
Fluorescentna slika viđena fluorescentnim mikroskopom, jedna je s morfološkim karakteristikama, druga je s bojom i svjetlinom fluorescencije, pri ocjenjivanju rezultata, to dvoje mora se kombinirati sa sveobuhvatnom prosudbom. Rezultati se bilježe prema subjektivnim pokazateljima, tj. vizualnim promatranjem radnika. Kao opće kvalitativno opažanje, u osnovi pouzdano. S razvojem tehnologije i znanosti, u različitim stupnjevima, upotreba objektivnih pokazatelja za bilježenje rezultata prosudbe, kao što je upotreba staničnog spektrofotometra, analizatora slike i drugih instrumenata. Međutim, rezultati zabilježeni ovim instrumentima također se moraju kombinirati sa subjektivnom prosudbom.
Tehnologija fotografije s fluorescentnim mikroskopom vrlo je potrebna za snimanje fluorescentnih slika, jer je fluorescenciju lako izblijedjeti i oslabiti, kako bi se trenutno zabilježili rezultati fotografije. Metoda je u osnovi ista kao i obična mikrografija. Samo trebate koristiti fotografski film velike brzine kao što je ASA200 gore ili 24. gore. Budući da ultraljubičasto svjetlo na efekt fluorescencije praska, kao što su FITC markeri, u ultraljubičastom zračenju 30-ih godina, svjetlina fluorescencije smanjena je za 50%. Stoga je brzina ekspozicije prespora za snimanje fluorescentne slike. Fluorescencijski mikroskopi za opće istraživanje imaju poluautomatske ili potpuno automatizirane uređaje za mikrofotografski sustav.
Mjere predostrožnosti:
(1) Radite u strogom skladu sa zahtjevima tvorničkog priručnika za fluorescentni mikroskop, nemojte samovoljno mijenjati postupak.
(2) Pregled treba obaviti u tamnoj komori. Nakon ulaska u tamnu komoru, spojite napajanje, upalite ultravisokotlačnu živinu lampu 5-15min, pričekajte da izvor svjetla emitira jaku svjetlost da se stabilizira, a oči potpuno adaptiraju na tamnu komoru i zatim počnite promatrati uzorak.
(3) Kako bi se spriječilo oštećenje očiju od ultraljubičastog svjetla, potrebno je nositi zaštitne naočale prilikom podešavanja izvora svjetlosti.
(4) provjerite vrijeme svaki put na 1 ~ 2h je prikladno, više od 90 min, jakost svjetla živine žarulje ultra visokog pritiska postupno se smanjuje, fluorescencija oslabljena; uzorci ozračeni ultraljubičastim svjetlom 3 ~ 5 min, fluorescencija je također značajno oslabljena; prema tome, * ne smije biti dulje od 2 ~ 3 sata.
(5) vijek trajanja izvora svjetlosti fluorescentnog mikroskopa je ograničen, uzorak treba centralizirano pregledati, kako bi se uštedjelo vrijeme i zaštitio izvor svjetlosti. Kada je vruće, treba dodati ventilator za hlađenje, novu žarulju treba zabilježiti od početka korištenja vremena. Kada se lampa ugasi i želi se ponovno koristiti, žarulja mora biti dovoljno ohlađena prije paljenja. Izvor svjetlosti treba izbjegavati nekoliko puta.
(6) Promatrajte uzorak odmah nakon bojenja jer će se fluorescencija postupno smanjivati tijekom vremena. Ako se uzorak stavi u polietilensku plastičnu vrećicu pohranjenu na 4 stupnja, to može odgoditi vrijeme slabljenja fluorescencije i spriječiti isparavanje sredstva za brtvljenje.
(7) Kriteriji prosudbe za svjetlinu fluorescencije: općenito podijeljeni u četiri razine, to jest 'jedan' - nema ili je vidljiva slaba fluorescencija. '+' - samo jasno vidljiva fluorescencija. '+ +' - vidljivo sa svijetlim
