Kako se fluorescentna mikroskopija razlikuje od laserske konfokalne mikroskopije
Fluorescentni mikroskop
1, fluorescentni mikroskop koristi ultraljubičasto svjetlo kao izvor svjetlosti, koristi se za zračenje predmeta koji se ispituje, tako da emitira fluorescenciju, a zatim promatra oblik objekta i njegovu lokaciju pod mikroskopom. Fluorescentni mikroskop se koristi za proučavanje apsorpcije, transporta, distribucije i lokalizacije kemijskih tvari u stanicama. Neke tvari u stanici, poput klorofila, mogu fluorescirati nakon ozračivanja ultraljubičastim svjetlom; postoje neke tvari koje same ne mogu fluorescirati, ali ako se boje fluorescentnim bojama ili fluorescentnim antitijelima, mogu fluorescirati i nakon zračenja ultraljubičastim svjetlom, a fluorescentna mikroskopija jedan je od alata za kvalitativno i kvantitativno istraživanje ove vrste tvari.
2, princip fluorescentnog mikroskopa:
(A) izvor svjetlosti: izvor svjetlosti zrači različite valne duljine svjetlosti (u ultraljubičastoj do infracrvenoj).
(B) izvor filtra pobude: kroz uzorak može proizvesti fluorescenciju određene valne duljine svjetlosti, dok blokira pobudu fluorescencije beskorisnog svjetla.
(C) Fluorescentni uzorak: općenito obojen fluorokromom.
(D) Blokirajući filtri: blokiraju pobudno svjetlo koje uzorak ne apsorbira radi selektivnog prijenosa fluorescencije, a neke se valne duljine u fluorescenciji također selektivno prenose. Mikroskop koji koristi ultraljubičasto svjetlo kao izvor svjetla kako bi ozračeni objekt fluorescirao. Elektronski mikroskop su Knorr i Haroska prvi put sastavili 1931. u Berlinu u Njemačkoj. Ovaj mikroskop koristi snop elektrona velike brzine umjesto svjetlosnog snopa. Budući da je valna duljina struje elektrona puno kraća od svjetlosnog vala, povećanje elektronskog mikroskopa može biti do 800,000 puta, rezolucija minimalne granice od 0,2 nanometra . 1963 počeo koristiti skenirajući elektronski mikroskop može se vidjeti na površini objekta sićušne strukture.
3, opseg primjene: koristi se za povećanje slike sitnih predmeta. Općenito se koristi u biologiji, medicini, mikroskopskim česticama i drugim promatranjima.
Konfokalni mikroskop
1, konfokalni mikroskop u reflektiranoj svjetlosti na cesti plus polu-reflektirajuća polu-leća, proći će kroz leću reflektirane svjetlosti savijenu u drugim smjerovima, u svom fokusu na pregradu s rupom, rupa se nalazi u fokus, iza pregrade nalazi se fotomultiplikatorska cijev. Može se zamisliti da se reflektirana svjetlost prije i poslije žarišne točke svjetla detektora kroz ovaj skup konfokalnog sustava neće moći fokusirati na malu rupu, već će biti blokirana pregradom. Dakle, fotometar mjeri intenzitet reflektirane svjetlosti u žarištu.
2, princip: tradicionalni optički mikroskop koristi poljski izvor svjetlosti, slika svake točke na uzorku bit će ometena difrakcijom ili raspršenjem svjetlosti od susjednih točaka; laserski skenirajući konfokalni mikroskop koristi lasersku zraku kroz osvjetljavajuću rupicu za formiranje točkastog izvora svjetlosti na uzorku u žarišnoj ravnini skeniranja svake točke na uzorku, uzorak je ozračen, u detekciji rupice na snimanju , detekcijom rupice nakon fotomultiplikatorske cijevi (PMT) ili uređaja za hladno elektrospojivanje (cCCD) točku po točku ili točku po točku ili točku po točku, intenzitet svjetlosti mjeri se fotometrom. cCCD) prima točku po točku ili liniju po liniju i brzo oblikuje fluorescentnu sliku na zaslonu monitora računala. Rupica za osvjetljenje i rupica za otkrivanje u odnosu na žarišnu ravninu leće objektiva je konjugirana, točka na žarišnoj ravnini istovremeno se fokusira na rupicu za osvjetljenje i rupicu za emisiju, točka izvan žarišne ravnine neće biti u rupici za otkrivanje na slike, tako da je konfokalna slika uzorak optičkog presjeka, prevladavajući nedostatke zamućenih slika običnih mikroskopa.
3, Područja primjene: medicina, istraživanje životinja i biljaka, biokemija, bakteriologija, stanična biologija, embriologija tkiva, znanost o hrani, genetika, farmakologija, fiziologija, optika, patologija, botanika, neuroznanost, biologija mora, znanost o materijalima, elektronička znanost, mehanika, naftna geologija, mineralogija.
