Kako prilagoditi intenzitet lasera laserskog skenirajućeg konfokalnog mikroskopa
Postoje dva faktora podešavanja za intenzitet lasera: gumb za kontrolu snage i aku-optički podesivi filtar (AOTF)
1. Gumb za kontrolu snage: Općenito postavljen na 30% maksimalne vrijednosti. Povećanje izlazne snage skratit će životni vijek lasera i stvoriti laserski šum. Prvo treba podesiti AOTF, PMT itd. kako bi se dobio najbolji intenzitet.
2. Akustičko-optički podesivi filtar: kontrolira snop pobudnog svjetla i intenzitet i može uključiti ili isključiti laser ili ga prilagoditi između 0-100% unutar milisekundi. To omogućuje korištenje različitih laserskih zraka za svaku točku slike i odabir potrebnog intenziteta.
Princip rada: koristi Braggov difrakcijski učinak zvučnih valova koji se šire u različitim medijima na upadnu Braggovu difrakciju u mediju širenja. Kada se unese određena frekvencija RF signala, AOTF difraktira upadnu polikromatsku svjetlost i odabire monokromatsku svjetlost s valnom duljinom ulaza. Valna duljina monokromatske svjetlosti odgovara-na-jedan s RF frekvencijom f. Sve dok je električni signal podešen, izlazna valna duljina može se brzo i nasumično mijenjati. AOTF postiže kontinuiranu prilagodbu intenziteta lasera i ima funkciju brze prilagodbe, ostvarujući lokalnu stimulaciju i skeniranje, brzo prebacivanje valne duljine (mikrosekundna razina). U laserskoj konfokalnoj mikroskopiji, fotomultiplikatorske cijevi ne mogu povećati intenzitet lasera, ali mogu prilagoditi intenzitet svjetla nakon snimanja. Stoga se podešavanjem napona fotomultiplikatorske cijevi može podešavati svjetlina slike. Osim toga, veličina žarišne rupice utječe na količinu fotona i također može prilagoditi svjetlinu slike. Fotomultiplikatorska cijev je posebna vakuumska cijev koja je izuzetno osjetljiva na ultraljubičasto, vidljivo i blisko-infracrveno svjetlo. Može pojačati dolazni slabi svjetlosni signal za 108 puta, omogućujući mjerenje svjetlosnog signala.
