Mjerenje volumena bloka tkiva pomoću bioloških mikroskopa
Do sada su kriofiksacija, zamrznuti ultra{0}}tanki rezovi i-sušenje smrzavanjem rutinske metode za rendgensku -mikroskopiju tkiva i stanica. Navedite sljedeće pojedinosti o ovoj metodi:
Biološki mikroskop s reflektorom može pomicati reflektor gore i dolje kako bi se postigla umjerena svjetlina, a otvor blende varijabilnog otvora blende također se može mijenjati kako bi se postigla umjerena svjetlina. Ako svjetlost dolazi od sunca, reflektor se može odgovarajuće podići i otvor blende promjenjivog svjetla može se odgovarajuće povećati. Ako je svjetlo prejako, reflektor se može na odgovarajući način spustiti, a otvor raskrižja na odgovarajući način smanjiti. Ako se i dalje osjećate zasljepljujuće u ovoj situaciji, možete odlučiti postaviti odgovarajući filter na nosač ispod reflektora. Ovaj hrast može postići svjetlinu koja vas zadovoljava. Naravno, podešavanjem gornjeg i donjeg položaja reflektora možete promijeniti veličinu otvora blende za očitavanje svjetla i odabrati odgovarajuće filtre, što zahtijeva određeno razdoblje prakse i iskustva.
Vrlo važno pitanje u biološkoj mikroskopiji je proces uzorkovanja i izolacije stanica. Nakon-sušenja zamrzavanjem i ugradnje smole (FD), zamrznuti ultra{2}}tanki dijelovi moraju se pažljivo obraditi kako bi se osiguralo da sadržaj od 65 elemenata svakog dijela nije oštećen tijekom promatranja i analize. Zbog brojnih koraka i visokih troškova uključenih u mikroanalizu X{-zrakama, žalosno je donositi netočne zaključke ako su analizirane stanice oštećene ili mrtve nakon dugotrajne obrade u više-koraka. Stanice miokarda odvojene tretmanom želatinazom imaju dva oblika, jedan je u obliku dugih štapića, a drugi je okrugao. Potonje se odnosi na umiruće stanice koje su oštećene tijekom procesa odvajanja stanica.
Sadržaj i raspodjela elektrolita u ove dvije vrste stanica vrlo su različiti pod biološkim mikroskopom. Na je vrlo visok, a K izuzetno nizak u cirkularnim kardiomiocitima, a koncentracija Ca u linearnim dendritima je vrlo visoka. Nakon provjere drugim analitičkim metodama, dokazano je da su visoki Na i niski K u kružnim stanicama te visoki Ca u mitohondrijima rezultat oštećenja membrane tijekom odvajanja stanica. Metoda hladne fiksacije stanica i tkiva često uključuje prvo gašenje, a zatim njihovo skladištenje u tekućem dušiku. Fiksacija kaljenjem ključna je za učinak očuvanja. Žive stanice ili svježa tkiva bogata su vodom, a kada se ugase, dijelovi stanica ili tkiva koji dolaze u izravan kontakt s rashladnim sredstvom (osobito kada se za hlađenje koristi tekući dušik) često se prvo zamrznu i fiksiraju, tvoreći "ljusku" koja sprječava drobljenje i fiksiranje središnjeg dijela stanica. Stoga se pri provođenju mikroanalize X{-zrakama često otkriva postojanje kristala leda u središnjem dijelu većih stanica. Kako bi se spriječilo da se ova situacija dogodi, kao rashladno sredstvo koristi se tvar s talištem višim od tekućeg dušika, ali nižim za 806c. Tih tvari ima mnogo, ali ih je lako nabaviti, a najpovoljniji je koncentrirani propan (vrelište 42,120c, talište 187,10c, molekularna težina 44,1), koji također ima brzu brzinu hlađenja. Ali njegov nedostatak je što je zapaljiv.
