Metoda izravnog brojanja mikrobnog mikroskopa
Eksperimentalni koraci (metoda izravnog brojanja pomoću mikrobnog mikroskopa)
1. Razrjeđivanje
Razrijedite suspenziju pivskog kvasca na odgovarajući način. Ako bakterijska otopina nije koncentrirana, nije je potrebno razrjeđivati.
2. Soba za mikroskopski pregled i brojanje
Prije dodavanja uzoraka izvršite mikroskopski pregled komore za brojanje ploče za brojanje. Ako ima prljavštine, potrebno ju je očistiti prije brojanja.
3. Dodajte uzorke
Pokrijte čistu i suhu ploču za brojanje krvnih stanica pokrovnim staklom, a zatim sterilnom finom kapaljkom s otvorom kapajte malu kap (ne previše) razrijeđene otopine kvasca s ruba pokrovnog stakla. Pustite da bakterijska otopina uđe u komoru za brojanje duž razmaka kapilarnom propusnošću. Općenito, komora za brojanje može se napuniti otopinom bakterija. Pazite da ne stvorite mjehuriće.
4. Mikroskopsko brojanje
Nakon odmora od 5 minuta, postavite ploču za brojanje krvnih stanica na postolje mikroskopa, prvo upotrijebite mikroskop male snage kako biste locirali mjesto sobe za brojanje, a zatim prijeđite na mikroskop velike snage za brojanje. Ako se prije brojanja ustanovi da je bakterijska otopina pregusta ili prerijetka, razrjeđenje treba ponovno prilagoditi prije brojanja. Opći zahtjev za razrjeđivanje uzorka je da treba biti približno 5-10 bakterijskih tijela po maloj stanici. Odaberite 5 ćelija iz svake sobe za brojanje (po izboru 4 kutne i središnje ćelije) za brojanje. Micelij koji se nalazi na liniji mreže općenito se računa samo na gornjoj i desnoj liniji. Ako kvasac nikne i veličina pupoljka dosegne polovicu matične stanice, mjere se dva broja bakterija. Za brojanje uzorka, sadržaj bakterija u uzorku treba izračunati na temelju vrijednosti dobivenih iz dvije komore za brojanje.
5. Očistite ploču za brojanje krvnih stanica
Nakon upotrebe, isperite ploču za brojanje krvnih stanica vodenim stupcem na slavini za vodu. Ne koristite tvrde predmete za pranje. Nakon pranja sami je osušite na zraku ili sušilom za kosu. Mikroskopskim pregledom, promatrajte postoje li zaostala bakterijska tijela ili drugi precipitati u svakoj maloj stanici. Ako nije čist, mora se više puta prati dok ne bude čist.
