Princip i rad mikroskopa tamnog polja
① Mikroskop tamnog polja ima neprozirni graničnik u središtu svog kondenzora. Sprječava ulazak izravne svjetlosti u leću objektiva; prikuplja se samo svjetlost koju reflektira i difragira uzorak. Kao rezultat toga, pozadina vidnog polja izgleda tamna dok su rubovi uzorka svijetli. Ovaj mikroskop može otkriti sitne čestice veličine 4–200 nm, s rezolucijom do 50 puta većom od one običnog mikroskopa sa svijetlim poljem.
② Princip Mikroskop tamnog polja modificiran je u odnosu na konvencionalni optički mikroskop na temelju Tyndallovog efekta. Kondenzator tamnog polja blokira središnju zraku od izvora svjetlosti tako da svjetlost ne može putovati ravno prema gore kroz uzorak u objektiv. Umjesto toga, svjetlost se preusmjerava kako bi osvijetlila uzorak koso. Preparat reflektira ili raspršuje upadnu svjetlost, a raspršena svjetlost ulazi u objektiv, stvarajući tamnu pozadinu u cijelom vidnom polju.
③ Opseg primjene Mikroskopija tamnog polja obično se koristi za promatranje neobojanih prozirnih uzoraka. Takvi uzorci imaju indeks loma blizak onom okolnog medija i teško ih je razlikovati pod uobičajenim osvjetljenjem svijetlim poljem. Osvjetljenje tamnog polja poboljšava kontrast između uzorka i pozadine. Može detektirati čestice do 4–200 nm. Međutim, pokazuje samo prisutnost, kretanje i površinske značajke objekata i ne može razriješiti njihove fine unutarnje strukture.
④ Operativni postupci
(1) Postavite kondenzator tamnog polja na držač kondenzatora mikroskopa.
(2) Koristite jak izvor svjetla. Izbjegavajte izravan ulazak svjetlosti u objektiv; općenito se koristi namjenska lampa za mikroskop.
(3) Stavite kap cedrovog ulja između kondenzatora i predmetnog stakalca. To sprječava potpunu unutarnju refleksiju svjetlosti na površini kondenzatora, koja inače ne bi uspjela osvijetliti uzorak za promatranje u tamnom polju.
(4) Podignite ili spustite kondenzor kako biste fokusirali njegov stožasti snop svjetlosti na uzorak. Ako je kondenzor opremljen kontrolama za horizontalno kretanje i centriranje, prvo izvedite centriranje kako biste precizno poravnali optičku os kondenzora s onom mikroskopa. (5) Odaberite objektiv koji odgovara kondenzatoru, podesite fokus i postavite sliku ciljanog uzorka u vidokrug.
