Nekoliko problema u korištenju fazno kontrastne mikroskopije:
(1) Preokret faze kada n '
(2) Halo i efekt postupnog zatamnjenja u procesu snimanja fazno kontrastne mikroskopije, kada struktura postaje tamnija zbog kašnjenja faze, nije gubitak svjetla, već rezultat preraspodjele svjetla na ravnini slike. Stoga će se svjetlo koje jasno nestaje u tamnim područjima pojaviti kao svijetla aureola oko tamnijih objekata. To je nedostatak fazno kontrastne mikroskopije, koja otežava promatranje finih struktura. Kada je prstenasti otvor vrlo uzak, halo fenomen je ozbiljniji. Drugi fenomen fazno kontrastne mikroskopije je efekt zatamnjenja, koji se odnosi na smanjenje kontrasta na rubovima većeg područja s istim faznim kašnjenjem koje se opaža tijekom promatranja faznog kontrasta.
(3) Utjecaj debljine uzorka Kada se promatra razlika, debljina uzorka treba biti 5 μm ili tanja. Kada koristite deblje uzorke, gornji sloj uzorka je jasan, dok će dublji sloj biti zamagljen i proizvoditi interferenciju faznog pomaka i interferenciju raspršenja svjetlosti.
(4) Utjecaj pokrovnog stakla i stakalca na uzorak mora biti prekriven pokrovnim staklom, inače se svijetli prsten prstenaste aperture i tamni prsten fazne ploče teško preklapaju. Diferencijalno promatranje također ima visoke zahtjeve za kvalitetu stakla predmetnog i pokrovnog stakla. Ako postoje ogrebotine, nejednaka debljina ili nejednake neravnine, to može uzrokovati izobličenje svijetlog prstena i smetnje u fazi. Osim toga, ako je predmetno staklo predebelo ili pretanko, to će uzrokovati povećanje ili smanjenje prstenaste blende.
Trenutno su optički mikroskopi evoluirali od tradicionalnih bioloških mikroskopa do raznih vrsta specijaliziranih mikroskopa. Prema principima snimanja, mogu se podijeliti na:
① Geometrijski optički mikroskop: uključujući biološki mikroskop, mikroskop padajućeg svjetla, invertni mikroskop, metalografski mikroskop, mikroskop tamnog polja itd.
② Fizički optički mikroskop: uključujući mikroskop s faznim kontrastom, polarizacijski mikroskop, interferencijski mikroskop, polarizacijski mikroskop s faznim kontrastom, interferentni mikroskop s faznim kontrastom, fluorescentni mikroskop s faznim kontrastom itd.
③ Mikroskopi za pretvorbu informacija: uključujući fluorescentne mikroskope, mikrospektometre, mikroskope za analizu slike, akustične mikroskope, fotografske mikroskope, televizijske mikroskope itd.
Navedite nekoliko namjena mikroskopa: a Biološki mikroskop: Općenito govoreći, mikroskopi se mogu podijeliti na stereo mikroskope i biološke mikroskope. Zbog različitih namjena i zahtjeva pojavile su se mnoge grane, ali osnovni principi ostaju isti. Polarizacija, fazni kontrast, transmisija i padajuće svjetlo još uvijek se klasificiraju kao biološki mikroskopi. Stereoskopski mikroskop, također poznat kao anatomski mikroskop, čvrsti mikroskop i stereo mikroskop, svestrani je mikroskop. Jednostavan je za rukovanje, ima niske zahtjeve za uzorke, ima veliku radnu udaljenost i ima snažan osjećaj trodimenzionalnosti pri promatranju. Može se koristiti za promatranje fizičkih objekata ili izvođenje nekih operacija na uzorcima tijekom promatranja. Umjesto rezanja uzorka poput biološkog mikroskopa, rezanje zahtijeva odgovarajuću tehnologiju i opremu. Stoga stereomikroskopi imaju širok raspon primjena u područjima kao što su mikroelektronika, sastavljanje i održavanje preciznih instrumenata i mikro graviranje. Široko korišten u anatomiji i mikrokirurgiji u poljima biologije i medicine (trenutno klasificirani kao kirurški mikroskopi), izvor svjetlosti koji se koristi u biologiji i medicini može biti samo izvor hladnog svjetla (optičko vlakno); Koristi se u industriji za promatranje, sastavljanje, inspekciju i druge radove na malim dijelovima i integriranim krugovima. Metalografski mikroskop: Mnogi ga ljudi vole pisati kao "metalografski mikroskop". Metalografski mikroskop je mikroskop koji se posebno koristi za promatranje metalografske strukture neprozirnih predmeta kao što su metali i minerali. Ovi neprozirni objekti ne mogu se promatrati u običnom transmisijskom mikroskopu, pa je glavna razlika između njih i običnog mikroskopa u tome što prvi koristi reflektirano svjetlo, dok drugi koristi propušteno svjetlo za osvjetljavanje. U metalografskom mikroskopu snop osvjetljenja se usmjerava od leće objektiva prema površini promatranog objekta, reflektira se od površine, a zatim se vraća na leću objektiva za snimanje. Ova metoda reflektirajućeg osvjetljenja također se široko koristi u detekciji silicijskih pločica integriranog kruga.
