Osnovna struktura mikroskopa i način rada uljne leće
Moderni opći optički mikroskopi koriste sustav dviju leća, okulara i leće objektiva, za povećanje slike, te se često nazivaju složeni mikroskopi. Sastoje se od dva glavna dijela: mehaničkog uređaja i optičkog sustava. U optičkom sustavu mikroskopa, performanse leće objektiva su najkritičnije, što izravno utječe na rezoluciju mikroskopa. Među nekoliko tipova leća objektiva koji se obično koriste u općim optičkim mikroskopima, uljna leća ima najveće povećanje i najvažnija je za mikrobiološka istraživanja. U usporedbi s drugim lećama objektiva, upotreba uljnih leća je posebnija, potrebno je dodati kap ulja za ogledalo između stakalca i leće, što je uglavnom zbog sljedeća dva aspekta:
1. povećati svjetlinu osvjetljenja uvećanja uljnog zrcala do 100 Χ, povećanje tako velike leće, žarišna duljina je vrlo kratka, promjer je vrlo mali, ali je intenzitet svjetlosti potreban najveći. Od nošenja uzoraka slajda kroz svjetlo, zbog različite gustoće medija (sa slajda u zrak, a zatim u leću), dio svjetlosti će biti zbog loma ili potpune refleksije, ne može ući u leću, što rezultira u korištenju uljnog zrcala bit će zbog manje svjetla, slika objekta ne izgleda jasno. Dakle, kako ne bi došlo do gubitka svjetlosti, u upotrebi uljnog zrcala mora se dodati između uljnog zrcala i stakalca s indeksom loma stakla (n=1.55) sličnim uljnom zrcalu (obično s cedrovim uljem, njegov indeks loma n=1.52).
2. Povećajte razlučivost mikroskopa Razlučivost ili moć razlučivosti mikroskopa je sposobnost mikroskopa da prepozna minimalnu udaljenost između dvije točke. S fizičke točke gledišta, razlučivost optičkog mikroskopa ograničena je pojavom interferencije i performansama korištene leće objektiva. Snaga razlučivanja D može se izraziti na sljedeći način: D=λ/2N.A, gdje je λ=valna duljina svjetlosnog vala; NA=brojčana vrijednost otvora blende objektiva. Izvor svjetlosti optičkog mikroskopa nije moguć izvan raspona valne duljine vidljive svjetlosti (0.4 - 0.7 μm), dok vrijednost numeričke aperture ovisi o leći objektiva, kutu ušća zrcala i lomu indeks medija između dijapozitiva i leće, koji se može izraziti na sljedeći način: NA=n × sin u kojem je polovica maksimalnog kuta upadanja svjetlosti. Ovisi o promjeru i žarišnoj duljini leće objektiva, općenito, u praksi maksimum može doseći samo 120 O, a n za indeks loma medija. Budući da je indeks loma cedrovog ulja (1,52) veći od indeksa loma zraka i vode (odnosno 1.0 i 1,33), cedrovo ulje kao leća u slajdu između medija uljano zrcalo može postići brojčanu vrijednost otvora blende (NA je općenito u 1.2-1.4) koja će biti veća od leće s malim povećanjem, leće s velikim povećanjem, kao što je suho zrcalo (NA su niže od 1. 0). Ako je prosječna valna duljina vidljive svjetlosti 0.55 μm, leća velikog povećanja s numeričkim otvorom od 0.65 može razlikovati objekte samo na udaljenosti ne manjoj od 0. 4 μm, dok rezolucija uljnog zrcala može biti oko 0,2 μm.
