Principi i strukturne karakteristike fluorescentnih mikroskopa
Fluorescentni mikroskop koristi visoko učinkovit točkasti izvor svjetlosti za emitiranje određene valne duljine svjetlosti (kao što je ultraljubičasto svjetlo 3650 ili ljubičasto plavo svjetlo 4200) kroz sustav filtera u boji kao pobudno svjetlo, koje pobuđuje fluorescentne tvari u uzorku da emitiraju različite boje fluorescencije, a zatim promatra kroz povećanje objektiva i okulara. Na taj način, čak i sa slabom fluorescencijom u jakoj pozadini, lako ga je prepoznati i ima visoku osjetljivost. Uglavnom se koristi za proučavanje stanične strukture, funkcije i kemijskog sastava. Osnovna struktura fluorescentnog mikroskopa sastoji se od običnog optičkog mikroskopa i nekih dodataka kao što su fluorescentni izvor svjetlosti, pobudni filtar, dvobojni razdjelnik snopa i blokirajući filtar. Fluorescentni izvor svjetlosti - obično koristi ultra-živine žarulje (50-200 W), koje mogu emitirati svjetlost različitih valnih duljina, ali svaka fluorescentna tvar ima valnu duljinu pobudne svjetlosti koja proizvodi najjaču fluorescenciju. Stoga je potrebno dodati pobudne filtre (obično ultraljubičaste, ljubičaste, plave i zelene pobudne filtre) kako bi se dopustilo da samo određena valna duljina pobudne svjetlosti prođe i ozrači uzorak, dok apsorbira svu ostalu svjetlost. Nakon što je ozračena pobudnim svjetlom, svaka tvar emitira vidljivu fluorescenciju s valnom duljinom većom od valne duljine ozračivanja u vrlo kratkom vremenskom razdoblju. Fluorescencija je specifična i općenito je slabija od ekscitacijske svjetlosti. Kako bi se promatrala specifična fluorescencija, potrebno je dodati filter za blokiranje (ili suzbijanje) iza leće objektiva.
Njegove su funkcije dvostruke: prvo, apsorbirati i blokirati ulazak pobudne svjetlosti u okular kako bi se izbjeglo ometanje fluorescencije i oštećenje očiju; drugo, za odabir i dopuštanje specifičnoj fluorescenciji da prođe, pokazujući specifičnu fluorescentnu boju. Dvije vrste filtara moraju se koristiti u kombinaciji.
