Zašto je povećanje uljne leće veće od običnog objektiva?
Razlozi zašto se bakterije moraju fiksirati prije bojanja u mikrobiološkim pokusima:
1: Uništi stanice i učini boju lakom za bojanje.
Drugo: Neka bakterije prianjaju na predmetno staklo i ne mogu se lako isprati vodom.
Prilikom fiksiranja sušiti polako. Ako baš želite ubrzati proces, možete ga sušiti nekoliko puta na udaljenosti iznad plamena alkoholne lampe. Nemojte sušiti staklo tako da se zagrije, inače može uništiti bakterijski oblik života.
Bojenje po Gramu i mikroskopsko promatranje bakterija
Eksperimentalni princip
Princip bojenja po Gramu: Različite reakcije bakterija na bojenje po Gramu posljedica su različitog sastava i strukture njihovih staničnih stijenki. Stanična stijenka Gram-pozitivnih bakterija uglavnom je mreža peptidoglikana. Kada se tretira etanolom, veličina pora mrežne strukture postaje manja zbog dehidracije, a propusnost se smanjuje, uzrokujući tako nastanak kompleksa kristalno ljubičasto-jod. Tvar se ne eluira lako i ostaje u stanicama. Nakon dekolorizacije i kontrabojanja još uvijek je zadržana plavo-ljubičasta boja primarne boje. Sloj peptidoglikana stanične stijenke Gram-negativnih bakterija je tanak i ima visok sadržaj lipida. Stoga se tijekom dekolorizacije lipidi otapaju etanolom (ili acetonom), a propusnost stanične stijenke se povećava, čineći kompleks kristalno ljubičasto-jod koji se relativno lako eluira. Nakon kontrabojenja kontrabojom stanice se boje crvenom bojom kontraboja. Princip mikroskopske slike: Moderni obični optički mikroskopi koriste dva sustava leća, okulare i leće objektiva, za povećanje slike, pa se često nazivaju složeni mikroskopi. U optičkom sustavu mikroskopa, performanse leće objektiva su najkritičnije. Uljna leća ima najveće povećanje i najvažnija je za mikrobiološka istraživanja. Glavna svrha dodavanja kapi ulja za leće između stakalca i leće je povećati svjetlinu osvjetljenja i povećati rezoluciju mikroskopa. Korištenje ulja umjesto zraka kao medija za širenje svjetlosti smanjuje lom ili potpunu refleksiju svjetlosti, čineći promatranu sliku jasnijom.
Potražite bakterijske kolonije koje treba promatrati pod mikroskopom s malim povećanjem (nastavite pomicati stakalce, ako osjetite crvenu sjenu, odmah prestanite, prilagodite povećanje, ako nije kolonija, nastavite gledati), podignite cijev leće , a zatim prijeđite na uljnu leću. Dodajte kap cedrovog ulja na područje uzorka i pomoću grubog regulatora pažljivo spustite kućište leće tako da uljna leća bude uronjena u ulje za leće i gotovo u kontaktu s uzorkom. Podignite kondenzator u najviši položaj i otvorite otvor. Pomoću grubog regulatora polako podignite cijev objektiva dok se slika objekta ne pojavi u vidnom polju i koristite fini regulator kako biste je učinili jasnom i izoštrenom.
